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- 2018-03-14 发布于天津
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高效液相色谱仪实用技术
Contents
一、HPLC的基本结构
Waters Acquity UPLC
高压输液泵
耐高压(150 ~ 350 × 105Pa)
耐腐蚀
密封性好
无脉动或脉动极小,流量恒定(RSD0.3%)
补充:1bar ≈14.5psi = 105Pa(145psi = 1MPa)
高压输液泵要求
高压输液泵类型
恒压泵
恒流泵
螺旋传动注射泵
往复柱塞泵
往复柱塞泵结构
二、仪器的日常清洗与维护
1、储液器
流动相
过滤:微孔滤膜的选择
脱气:脱气方式
储存方法
2、泵的维护
流速的升起与降低
流动相是否充足
梯度洗脱在线脱气保持开启
3、六通阀的使用及清洗
推荐清洗方法:
在load与inject之间切换清洗
推荐使用方法
完全填充环:进样量为定量环体积的2~5倍
部分填充环:进样量不大于定量环体积的1/2
(注:阀切换速度过慢会对泵造成损伤,并影响进样量的准确度)
4、色谱柱的维护及清洗
柱接口的维护
预柱的清洗:3阶段
反相键合相色谱柱的清洗顺序:由样品和流动相组成决定
5、检测器的维护
氘灯(寿命2000h左右)
不宜频繁开关
不使用时最好关闭
冲柱时可以不接检测器
三、常见故障的排查及解决
1、泵前流路气泡
原因:
滤头堵
流动相脱气不彻底
解决方法:
拆下滤头用纯水和甲醇各超声10min
将流动相摇匀后超声10min(1000ml)
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