第四章_基因工程所需的基本条件教材教学课件.ppt

加入150 ? l溶液III，加盖后颠倒6-7次混匀，放置5min; 用台式高速离心机，10000r/min离心7min，上清移入另一干净离心管，并加1ml 100％乙醇混匀，12000r/min离心5min，弃去上清液; 沉淀用0.5ml 70％乙醇清洗一次， 12000r/min离心5min，弃去上清液，小管倒置于吸水纸上，除尽乙醇，室温自然干燥; 加入30-50?l含有20?g/ml RNase的灭菌蒸馏水或TE 缓冲液溶解提取物，室温放置15-30min，使DNA充分溶解(有时需要酚:氯仿抽提); 将分离出的质粒DNA置于-20℃保存备用。 1、 λ 噬菌体的生物学特性 三、λ噬菌体载体 有尾部结构的二十面体 λ噬菌体由外壳包装蛋白和DNA组成。 裂解周期和溶原周期 2、λ噬菌体的生活周期 裂解周期 溶原周期 λ噬菌体感染大肠杆菌后，通过同源重组，将其DNA整合到宿主细胞的染色体DNA上，并不产生子代噬菌体颗粒，这种状态称为溶原状态，这个过程称溶原化。整合主要由λ -DNA上的cⅠ和int两基因的产物所激活。 原噬菌体（prophage)： 整合到细菌染色体的噬菌体DNA称为原噬菌体，随细菌的染色体复制而复制。 3、λ噬菌体的基因组 1）线状双链DNA分子，全长48.502bp。 2）两端的5’末端具有12碱基的突出互补的粘性