[高二理化生]62 基因工程及其应用.pptVIP

一、基因工程原理 质粒的特点： 2、将目的基因导入动物细胞 （1）方法：显微注射法 （2）程序： 哺乳动物 细胞 溶血栓剂 酵母菌 乙型肝炎疫苗 酵母菌 a—干扰素 大肠杆菌 白细胞介素-2 大肠杆菌 人胰岛素 应用 菌株或细胞 产品名称 治疗糖尿病 治疗某些癌症 治疗癌症或病毒感染 预防病毒性肝炎 治疗心血管病 （心脏病） 2.基因工程与药物研制 　　干扰素治疗病毒感染简直是“万能灵药”！过去从人血中提取，300L血才提取1mg！其“珍贵”程度自不用多说。 　　人造血液、白细胞介素、乙肝疫苗等通过基因工程实现工业化生产，均为解除人类的病苦，提高人类的健康水平发挥了重大的作用。 人造血液及其生产 3.环境污染治理：利用转基因细菌降解有毒有害的化合物，吸收环境中的重金属，分解泄漏的石油，处理工业废水等。 　　通常一种细菌只能分解石油中的一种烃类，用基因工程培育成功的“超级细菌”却能分解石油中的多种烃类化合物。有的还能吞食转化汞、镉等重金属，分解DDT等毒害物质。 能发荧光的热带斑马鱼 能发光的水母 * 基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。 通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。 原 理： 操作水平： 结 果： 目的 基因 供体 细胞 受体 细胞 基因重组 DNA分子水平 定向地改造生物的遗传性状， 获得人类所需要的品种。 获得 新性状 操作环境： 生物体外 人类染色体 细菌质粒 胰岛素基因 一些限制性酶可以 切割不同类型的DNA 胰岛素基因通过粘性末端插 入质粒中，缺口由酶来封闭 胰岛素基因 质粒 A A T T T T A A TTAA AATT 提取 培育转基因大肠杆菌的简要过程 普通大肠杆菌 (不能分泌胰岛素) 人体组织细胞 胰岛素基因 与运载体DNA拼接 导入 大肠杆菌(含胰岛素基因) 转基因大肠杆菌 (能分泌胰岛素) 培育转基因大肠杆菌的关键步骤 1.提取目的基因 胰岛素基因从人体细胞内提取出来 2.目的基因与 运载体结合 胰岛素基因与运载体DNA连接 基因的“剪刀” 基因的“针线” 基因的运载体 胰岛素基因导入受体(大肠杆菌)细胞 3.将目的基因 导入受体细胞 基因工程的所需的工具 种类: 来源: 特点: 1.基因的“剪刀” 限制酶 微生物 专一性 已发现200多种 作用: 只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定切点切割DNA分子双链。 （作用于磷酸二酯键） 大肠杆菌(EcoRI)的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 限制酶 G G C C A A A A T T T T CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 练习使用 EcoRⅠ 剪切目的基因 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 目的基因 黏性末端 什么叫黏性末端？ 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 基因工程的所需的工具 DNA连接酶 2.基因的“针线” 作用：连接DNA片段之间 的磷酸二酯键 DNA连接酶：主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键 起连接作用，在基因工程中起作用。 　　 DNA聚合酶：主要是连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之 间的磷酸二酯键，在DNA复制中起做用。 基因的针线——DNA连接酶 （二）基因操作的工具 磷酸二酯键 使用DNA连接酶制作重组DNA分子 甲片段 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT 乙片段 GGCATCTTAA AATTCCGTAG GGCATCTTAA AATTCCGTAG 基因工程的所需的工具 3.基因的运载体 常用的 运载体： 质粒、噬菌体、动植物病毒等 作 用： 将外源基因送入受体细胞。 作为运载体必须具备以下条件： 1.能够在宿主细胞中复制并稳定地保存； 2.具有多个限制酶切点以便与外源基因连接； 3.具有某些标记基因，便于进行筛选。 标记基因：如抗生素抗性基