(HIV)珠海丽珠试剂简明操作步骤.docVIP

（HIV）珠海丽珠试剂简明操作步骤 一、开机 1、所有实验用的仪器提前打开预热30分,空调设置20～25℃。 2、打开酶标仪的电源开关，打开电脑然后双击桌面上的应用程序，选择用户并输入密码123，点击进入，仪器自检完后即可进入主菜单。注意：必须先开酶标仪后再打开程序，否则仪器无法完成自检。 3、在开始一个新项目前，或新试剂前填写项目设置；（按RT—6100简明操作步骤中B项目设置填写） 二、操作步骤： 1、配洗液：将20倍浓缩50ml的洗液，倒1000ml塑料量桶中；将蒸馏水加至1000ml，再倒入洗板机当前设置的洗液桶中。 2、加样：将已经平衡室温的试剂所需数量的板条固定于板架，未完成的放置于有干燥剂的封口袋中密封保存。在通风柜中操作，每次实验设阴性对照3孔、阳性对照2孔、质控对照2孔分别加入阴、阳性对照和质控对照50ul，其余孔加入50ul待测样品。 3、温育：盖上封板膜，放置水温箱，置37℃温育30分钟，用定时钟定时。 4、洗涤：到时后，拿出板架，将板架放置洗板机上洗涤，弃去孔内液体，将稀释后的洗液注满各孔，静置30—60秒，弃去孔内洗液。重复洗4次后，用蒸馏水再洗两次拍干。 5、加酶：将洗好的板放置通风柜内，用加样枪给各孔加入酶标记物50ul。 6、温育：盖上封板膜,放置水温箱，置37℃温育30分钟，用定时钟定时。 7、洗涤：到时后，拿出板架，将板架放置洗板机上洗涤，弃去孔内液体，将稀释后的洗液注满各孔，静置30—60秒，弃去孔内洗液。重复洗4次，后用蒸馏水再洗两次拍干。 8、显色：将洗好的板放置通风柜中，每孔加入底物缓冲液50ul，再加入底物液50 ul，振荡混匀，盖上封板膜，置37℃温育30分钟，用定时钟定时。 9、终止：到时取出板架放置通风柜中,每孔加入终止液50ul,轻拍混匀。 10、读值：把板架放置酶标仪上，用酶标仪读值，在单波长450nm或双波长450nm/630nm下读取各孔A值，应在15分钟内完成、保存、打印。 三、结果判定： 1、要求：阳性对照A值应≥0.8 阴性对照A值应≤0.12 2、临界值（C.O）计算： 临界值（C.O）＝0.15+阴性对照平均A值 备注：阴性对照平均A值小于0.08按0.08计算，大于0.08按实际值计算。 3、结果判断： 样品A值≥临界值（C.O）为HIV抗体阳性 样品A值＜临界值（C.O）为HIV抗体阴性 4、初次实验阳性者应重新取样进行双孔复试，如果复试中任何一孔为阳性,则样品视为HIV抗体阳性，对复试结果为阳性的样本请按《全国艾滋病检测技术规范》处理。 四、注意事项： 样品收集及保存 1、待测的血清或血浆样品不可用NaN3防腐。 2、短期（1周）内进行检测的血清或血浆样品可存放于2～8℃，如需长期保存，应置于-20℃。避免反复冻融。 实验准备 1、本试剂的使用单位必须是经各级卫生行政部门批准的HIV检测实验室。 2、整个HIV检测必须符合《全国艾滋病检测技术规范》，严格防止交叉感染。操作时必须戴手套、穿工作服，严格健全和执行消毒隔离制度。 3、从冷藏环境中取出的试剂盒应平衡至室温后方可打开使用。 4、未使用完的预包被板条应置于有干燥剂的封口袋中密封保存。 5、若20倍浓缩洗液出现结晶，请置于37℃至溶解后再使用。 6、不同批号的试剂组份不可混用。 7、本试剂盒及各种废弃物应按传染性物品处理。 实验操作 1、试剂使用前应充分摇匀。 2、洗涤时各孔均需加满洗液，以防止孔口有游离酶标记物未被洗净。 3、结果判读请在反应终止后15分钟内完成。 4、测定结果必须以酶标仪读数为准。