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6 疫苗的发展前景 治疗性疫苗 大剂量高度纯化的微生物抗原和能提高免疫功能的其他组分组合而成的治疗性疫苗，抗原量大，免疫原性强，对免疫系统有较强的刺激作用，而且疫苗通过不同的途径把微生物抗原递呈给免疫系统，能更有效地诱导免疫应答，且可消除免疫耐受。 6 疫苗的发展前景 目前，已有治疗性疫苗治疗麻风、慢支、疱疹病毒感染、爱滋病和乙肝等疾病的临床试验报告。肿瘤疫苗也是研究的热点之一。 通过食物摄取的疫苗和个性化疫苗。 多价联合疫苗。 第四节 基因工程药物 基因工程技术的迅猛发展，使人们能够十分方便有效地生产许多以往难以大量获取的生物活性物质，甚至可以创造出自然界中不存在的全新物质。 自1982年第一个基因工程药物——人胰岛素在美国被批准生产与使用以来，迄今为止，已有大约200种的基因工程药物上市。目前，利用基因工程技术，不仅可以生产多肽类激素和细胞因子，还可生产疫苗等生物制品、基因的诊断和治疗的产品。 部分基因工程蛋白药物 我国基因工程药物研究概况 我国基因工程药物的开发起步较晚、基础较差，但一开始就受到政府的高度重视。1986年我国开始实施紧跟国际高新技术发展潮流的“863计划”，生物技术首当其冲被列为重点领域之一，并确定了农业和医药两个主要突破口。 1997年我国第一种基因工程药物重组干扰素α-1b获得国家一类新药证书，成为第一个实现产业化的基因工程程药物。随后，我国又相继研制成功多种基因工程药物和疫苗，现在几乎国外研究的最新生物药物我国基本上都有，世界上销售排在前10位的生物药物我国大多都能自行生产。 但是，我国的基因工程药物仍以仿制为主，我们必须开展创新基因工程药物的研究，加强下游生物技术的开发，尽量缩短与国际先进水平的差距。 基因工程药物的特点 1. 稳定性差，易腐败 2. 使用量低，但药理活性极高 3. 具有细胞和组织特异性 4. 注射用药有特殊要求  基因工程药物研发的五个阶段 （1）制备基因工程菌株（或细胞）及实验室小试阶段，主要涉及DNA重组技术，称为基因工程上游技术； （2）中试与质量检定阶段，主要涉及基因工程产物的分离、纯化，称为基因工程下游技术； （3）临床前研究阶段； （4）临床试验阶段； （5）试生产阶段。 基因工程上游技术的工作主要在实验室内完成，包括目的基因的制备、选择或改造作为载体的DNA、目的基因与载体的重组、重组DNA引入宿主细胞；工程菌或工程细胞的筛选、表达；鉴定目的基因的表达产物。 下游技术则指在构建了稳定表达的细胞株，并经过实验室小试后，进行大规模工程菌发酵或细胞培养、分离纯化、制剂、质量控制等一系列工艺过程。  基因工程技术在医药工业中的应用 （1）基因工程药物品种的开发 利用基因工程细菌等表达人类一些重要基因片段，可产生具生理活性的肽类和蛋白质类药物。 （2）应用基因工程技术建立新药的筛选模型。 （3）应用基因工程技术改良菌种，产生新的微生物药物。 （4）基因工程技术在改进药物生产工艺中的应用。 （5）利用转基因动、植物生产蛋白质类药物。 （6）基因工程抗体在医药工业中的应用。 重要的基因工程药物 胰岛素 干扰素 白介素 促红细胞生成素 重组干扰素-α IFNα-2b是由165个氨基酸残基组成的单肽链蛋白质，相对分子质量理论值为19247，含四个Cys残基，形成两个二硫键。分子中无糖基化位点，等电点在5～6之间，在pH 2.5的溶液中稳定，对热亦稳定，对各种蛋白酶敏感；比活为2×108IU／mg。 IFN-2b来自于正常细胞系，因此临床应用中产生抗体的频率较低，仅为6％，应用前景较广。 重组干扰素α-2b的制备工艺路线 重组干扰素-α的制备 用基因工程的方法构建阳性质粒pGAPZαA，通过大肠杆菌获得大量载体，然后转化酵母SMDll6，从而获得阳性酵母菌落，通过高浓度的zeocin筛选获得高表达工程菌， 在pH 4.0～5.0、300 r／min、30℃培养至OD6006～8时，获得最大量rhIFNα-2b，上清液依次通过阴离子和阳离子交换及冻干等步骤，获得纯品。 重组干扰素α-2b的制备工艺过程 基因的制备 构建重组质粒 酵母转化 发酵及表达产物的SDS- PAGE分析 样品的纯化 重组干扰素α-2b的制备工艺过程 基因的制备 根据hIFNα-2b一级结构和pGAPZαA的组成设计引物，通过PCR进行扩增。 构建重组质粒 用Xho I／Xba I分别酶切huIFNα-2b／T-Vector和pGAPZα A，回收目标片段后按常规方法构建表达质粒，即将基因插入pGAP启动子和α-factor信号肽下游的Xho I／Xba I位点，构建成分泌型酵母表达重组质粒。 重组干扰素α-2b的制备工艺过程 酵母