部分检验项目的临床意义及报告解读.ppt

HBV颗粒结构 HBV 的复制 细胞外乙型肝炎病毒DNA是一种松弛环状的双链DNA（relaxed circularDNA，rcDNA）分子，其两条链均不是闭合的，其中负链较长，约3200个碱基，含有乙肝病毒基因组的全长基因，在其5’起始端与3’末端之间有一个数个碱基的“缺刻”(nick)；正链较短，有较大的“缺口”(gap)，其3’末端不固定，故长度是可变的，约为负链长度的50%～100%。在乙肝病毒的复制过程中，病毒DNA进入宿主细胞核，在DNA聚合酶的作用下，两条链的缺口均被补齐，形成超螺旋的共价、闭合、环状DNA分子（covalently closed circularDNA，cccDNA）。cccDNA是乙肝病毒前基因组RNA复制的原始模板，虽然其含量较少，每个肝细胞内只有约5～50个拷贝，但对乙肝病毒的复制以及感染状态的建立具有十分重要的意义，只有清除了细胞核内的cccDNA，才能彻底消除乙肝患者病毒携带状态，是抗病毒治疗的目标。 HBV基因组 HBV 侵入人的肝细胞,在细胞质中脱去核壳,形成rcDNA。rcDNA 进入肝细胞核中解脱负链5′端连接的末端蛋白、正链5′端的RNA 残段;依赖宿主细胞的DNA 聚合酶补齐两条链上的缺口,并进一步折叠、扭曲形成超螺旋结构的cccDNA ,并以cccDNA 为模板转录为不同大小的mRNA ( 315 Kb、214 Kb、211 Kb、018 Kb mRNA) ,从而翻译各种病毒蛋白。其中315 Kb 的mRNA 作为逆转录模板,利用病毒的逆转录酶合成全长的基因组负链DNA ,再以负链DNA 作为模板,通过病毒DNA 聚合酶的作用,合成正链DNA , 与负链DNA 一起组成新的HBV rcDNA。新合成的HBV rcDNA 一方面进入细胞核内,转化为新的cccDNA ,补充细胞内的cccDNA 库,使每个肝细胞中保持大约5～50 个cccDNA分子;另一方面与病毒蛋白装配成新的完整HBV ,释放至细胞外,再感染健康的肝细胞。 方法的局限性 CK-MB 非梅毒螺旋体抗原血清试验的优点 1、非梅毒螺旋体抗原血清试验阳性的患者往往是梅毒现症感染者，临床上即可开展治疗 2、非梅毒螺旋体抗原血清试验表现为滴度随成功的治疗而逐渐下降，故可以作为疗效观察的指标 3、此类方法价格低廉 影响检验结果的因素 病人方面 目前公认运动、过度空腹、饮食、饮酒、吸烟及姿势体位等可影响某些检验的结果。 标本采集方面 标本采集是直接关系到检验结果的基本功，如标本采集不当，即使最好的仪器设备，也难以弥补在采集标本时引起的误差和错误。相关人员应按不同的检测项目，正确的采集标本。 仔细查对 抗凝剂的应用 输液的对侧 标本量的准确 无菌容器防止污染 培养标本应在用药前采集 项目的参考范围 检验结果的合理误差 山东省临床检验中心质量评价标准 方法的局限性 抗原浓度 抗体过剩 抗原过剩 Ag * Ab 信号 测定范围 几个补充说明 为何要做确认实验 梅毒 艾滋 丙肝 梅毒螺旋体的免疫性 人类对梅毒无先天免疫性，尚无疫苗接种进行人工免疫，仅能在受感染后产生感染性免疫。已完全治愈的早期梅毒患者仍可以再感染 感染梅毒后，首先产生IgM型抗梅毒螺旋体抗体，感染2周后即可测出，早期梅毒抗梅治疗3～9个月后或晚期梅毒治疗2年后，大部分病人IgM可转阴性，再感染时又出现阳性，故IgM型抗体的存在是活动性梅毒的表现 感染梅毒4周左右产生IgG型抗梅毒螺旋体抗体，即使经足量抗梅治疗，梅毒螺旋体抗原消失后很长时间，IgG抗体仍可通过记忆细胞的作用继续产生，甚至终生在血清中可测出 梅毒螺旋体的免疫性 另一种具有抗体性质的物质叫反应素（reagin），是梅毒螺旋体破坏人体组织过程中释放出的一种抗原性心磷脂刺激机体所产生的抗体。反应素一般在感染后5～7周（或下疳出现后2～3周）产生。经正规治疗后可逐渐消失 非特异性梅毒血清学试验 非梅毒螺旋体抗原血清试验：是以心磷脂、卵磷脂及胆固醇作为抗原检查血清中的反应素，用于初筛试验及疗效观察。可以分为以下四种试验，原理基本相同 1、性病研究实验室玻片试验（VDRL) ：试剂需现配现用，且要在显微镜下观察结果，故国内实验室很少采用。但VDRL是诊断神经性梅毒最特异的血清学方法 2、不加热血清反应素试验（USR)：试剂无需现配现用，但仍要在显微镜下观察结果，现已很少使用 3、快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR)：在特制的纸片上进行，加入一定量特制的炭粉，可使抗原抗体出现凝集，用肉眼可观察结果 4、甲苯胺红不加热试验（TRUST)：在试剂中以红色的甲苯胺红颗粒代替黑色的炭粉颗粒，使结果更易于观察 非特异性梅毒血清学试验 非梅毒螺旋体抗