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[医药]MIP论文:MIP 储藏蛋白质 膜泡运输 突变体筛选
MIP论文:拟南芥种子储藏蛋白质相关因子MIP突变体的筛选和表型分析
【中文摘要】植物种子储藏蛋白质为种子萌发和植物早期生长提供重要氮源,其含量也是影响作物品质的重要指标。拟南芥的种子储藏蛋白质主要是通过囊泡运输方式来完成转运的。膜泡运输主要分为出芽(Budding)、运输(Movement)、拴留(Tethering)和融合(Fusion)四个过程。囊泡运输过程受到许多因子的调控,如Coa、SM、Tether、SNARE和Rab蛋白等,其中,Tether因子在囊泡和靶位膜的最初接触过程中发挥重要功能。在我们的前期研究中发现,MAG2属于一种tether因子,它在种子储藏蛋白质在内质网与高尔基体之间的运输中起重要调节作用;MIP基因与MAG2有相互作用,然而它们的功能都是未知的。本研究的是筛选MIP基因缺失突变体,并进行初步的表型分析
【英文摘要】Plant seed storage proteins are important nitrogen source of seed germination and early growth of seedling, the amount of seed storage proteins is an important indicator of quality of crops. In Arabidopsis, seed storage proteins are mainly delivered by vesicles. The delivery includes four steps:Budding, Movement, Tethering, and Fusion. Many factors are involved in the pathway, including Coat, SM, Tether factor, SNARE and other proteins. Tethering factors are essential for the first identification between ve...
【关键词】MIP 储藏蛋白质 膜泡运输 突变体筛选
【英文关键词】MIP storage proteins vesicle traffic mutant screening
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【目录】拟南芥种子储藏蛋白质相关因子MIP突变体的筛选和表型分析
摘要
4-5
Abstract
5
1 绪论
8-16
1.1 种子贮藏蛋白质
8-11
1.2 膜泡运输的定向机制
11-13
1.3 贮藏蛋白质储藏与运输及相关衍生结构
13-16
2 材料与方法
16-26
2.1 实验材料
16
2.1.1 供试植物
16
2.1.2 PCR扩增检测salk突变体
16
2.2 试验方法
16-21
2.2.1 种子处理
16
2.2.2 取样
16
2.2.3 植物体基因组的提取
16-17
2.2.4 PCR扩增检测
17
2.2.5 琼脂糖凝胶电泳
17
2.2.6 Western检测拟南芥突变体
17-21
2.3 实验结果及结论
21
2.4 拟南芥培养
21
2.5 拟南芥突变体的获得途径
21-25
2.5.1 插入突变法
22-24
2.5.2 物理诱变
24-25
2.6 拟南芥种子贮藏蛋白相关因子MIP突变体筛选目的
25
2.7 拟南芥及突变体的培养技术
25-26
3 结果与分析
26-39
3.1 突变体的筛选
26-35
3.1.1 mip1-1筛选Genotyping PCR
26-29
3.1.2 mip2-1筛选Genotyping PCR
29-32
3.1.3. mip3-1筛选Genotyping PCR
32-35
3.2 突变体表型观察
35-39
3.2.1 MIP基因缺失对突变体植物生长发育的影响
35
3.2.2 对mip1-1和mip3-1纯合体以及mip2-1杂合体种子的全蛋白的western blotting检测
35-39
结论
39-40
参考文献
40-46
攻读学位期间发表的学术论文
46-47
致谢
47-48
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