单克隆抗体药物及动物细胞培养简介.pdf

单克隆抗体药物及动物细胞培养简介 徐卫涛, 产品应用专家, 赛多利斯斯泰迪（北京）有限公司上海分公司 weitao.xu@ 简介  单克隆抗体的发展与历史  动物细胞培养发展与历史  细胞培养模式及工艺优化 2 单克隆抗体的发展与历史 什么是抗体？ 什么是单克隆抗体？ 25/10/2013 page 3 抗体 动物免疫系统受到刺激原刺激后,引起免疫反应产生的球蛋白. 抗原 能引起机体免疫应答反应的物质就是抗原. 免疫应答 抗原 刺激 B细胞 浆细胞 抗体 抗体的不纯性 一种抗原有多种不同的决定簇,刺激的是多种B细胞,作用于不同 的B细胞后,会产生多种抗体, 这是多克隆的, 故不纯! 怎么才能得到纯的抗体? 要想获单一的纯抗体,就必须从一个B细胞出发. 光纯还不行,还要大量.怎么办? 让B细胞大量繁殖(克隆)就可以产生大量抗体了. 但，有问题: B细胞是不能无限繁殖的.怎么办? 找，什么细胞能无限繁殖呢? 癌! 只有癌细胞. 但它不能产生抗体. 思路就出来了: 癌细胞能无限繁殖,但不能产生抗体.B细胞能产生抗体,但不能大量繁 殖.融合呀!只要将两个细胞融合即可互补. PEG诱导细胞融合 B 瘤 免 疫 矿物油 脾 HAT筛选 关 骨髓瘤 键 一 步 杂交瘤细胞 大量培养 McAb 问题: 在培养体系中, 有几种细胞. B细胞、瘤细胞,和杂交细胞。 单克隆抗体的发展与历史 1975年，单克隆抗体-杂交瘤技术宣告诞生； 1986年，美国FDA批准全球第一个治疗性鼠源性单克隆抗体OKT3上市，由此拉开了单抗药物 治疗疾病的序幕 1998年，单克隆抗体进入大量审批上市阶段； 1999年，我国最早上市的单抗是武汉生物制品研究所生产的T淋巴细胞CD3抗原单抗； 2006年，国内单抗药物领军企业中信国健研发的重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋 白（益赛普）上市； 截止到2012年5月，FDA批准上市了45个单抗治疗性药物。 单克隆抗体的发展与历史 治疗性抗体的分类 1 鼠源抗体: 使用异种抗原免疫小鼠，然后通过纯化小鼠的腹水得到针对该抗原鼠的多克隆抗体， 再经过骨髓瘤细胞融合得到可持续表达的单克隆抗体。例如： 1986年FDA 批准的Ortho Biotech公司Orthoclone-OKT3 。 此方法主要的杂质为鼠源性生物大分子和脂类等。鼠源抗体可诱导产生人抗鼠抗体 （HAMA），不仅影响疗效，而且增加患者后续应用的临床风险。1980-1987年进入临床 研究的鼠源抗体药物占同期总