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 （1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用北京大学真菌和真菌病研究中心北京大学第一医院余进 国内深部真菌感染不容忽视 国内情况 我院血液科(2004.5-2005.5共118例患者) 确诊和临床诊断有7例,发生率为5.9% 以血液病为主的深部真菌感染高危患者中，发生感染的危险因素有2种及2种以上广谱抗生素应用、念珠菌菌落定植和应用尿管，其中广谱抗生素应用是最主要的危险因素 深部真菌感染 条件致病性真菌 念珠菌病 曲霉病 隐球菌病 其他 对于侵袭性真菌感染…… 诊断滞后治疗手段有限 基础疾病 病死率很高 念珠菌血症若不治疗死亡率可以达到45-76%侵袭性曲霉病死亡率高达55-70% 诊断方法 显微镜检查 培养 血清学 分子生物学 镜检和培养方法 非培养方法优点 快速报告结果 敏感性提高 取材简便 多以真菌在致病状态产生的物质为检测标志物，结果阳性提示有致病性 定量检测可判断感染严重程度及疗效评估 非培养诊断的方法简介 真菌细胞壁成分 （1-3） - β- D-葡聚糖检测（G试验） 真菌抗原检查 半乳甘露聚糖（galactomannan) 抗原（GM) 甘露聚糖(mannan)抗原 隐球菌荚膜多糖抗原（乳胶凝集试验） 真菌特异的代谢产物 D-阿拉伯糖醇 真菌 DNA 的检测 深部真菌感染的诊断标准EORTC/MSG2008修订版 宿主因素 临床特征 病原学 真菌镜检 真菌培养 组织病理学检查 血清学检查方法（间接证据） CSF隐球菌抗原阳性——确诊 GM-test, G-test——临床诊断 （1-3） - β- D-葡聚糖检测 （1-3） - β- D-葡聚糖检测 真菌细胞壁成份，占50%以上 其他微生物、动物及人的细胞不含该成份 用于侵袭性真菌感染的早期诊断 方法：G试验 β-葡聚糖可特异性激活鲎（Limulus）变形细胞裂解物中的G因子，引起裂解物凝固，故称G试验。 Beta-D-glucan 通过激活G因子（ Factor G）引起凝集 内毒素通过激活C因子（Factor C）引起凝集 试剂盒: 祛除Factor C ? Glucan 特异 BG检测的特点 可检测多种致病真菌感染 念珠菌,曲霉,肺孢子菌,镰刀菌,地霉,组织胞浆菌,毛孢子菌等 不能用于检测隐球菌和接合菌感染 阳性结果代表存在侵袭性真菌感染 真菌对数生长期释放量最大 ,可被体内葡聚糖酶降解(glucanase) 每周检测2次 BG检测用于念珠菌血症 敏感度为62%-100%，特异度为64%-88% 不同种念珠菌感染对葡聚糖检测无明显影响 白念珠菌,光滑念珠菌, 热带念珠菌,克柔念珠菌,季也蒙念珠菌和葡萄牙念珠菌 近平滑念珠菌BG水平较低 BG检测用于念珠菌血症 BG检测敏感度明显高于Mannan检测 79.6%vs42% 阳性早于血培养阳性和临床症状出现 对于念珠菌血症, BG检测是首选检查 β-（1-3）-D-葡聚糖(BG)检测用于侵袭性曲霉感染（IPA) 敏感度为55%-100% 特异度为52%-100% 对于确诊IPA，阳性率为85.7-100% 高度可疑IPA，阳性率为52.4-66% 侵袭性曲霉感染（IPA) BG检测与半乳甘露聚糖(GM)检测 BG检测( 阳性界值为60pg/mL)和GM（阳性界值为1.0）比较 二者在体内的代谢动力学相似，敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值均相同，分别为87.5%、89.6%、70%和96.3% 二者联合可以提高特异度和阳性预测值，对敏感度和阴性预测值没有影响 J Clin Microbiol, 2005, 43:299-305. BG检测与半乳甘露聚糖(GM)检测 BG检测与GM检测 敏感度67%vs38% 特异度90%vs100% 感染曲霉种类的影响 抗真菌药物应用的影响 抗生素应用的影响 BG检测 对于烟曲霉和非烟曲霉感染无差别 GM检测 烟曲霉感染的敏感性明显低于非烟曲霉感染 抗真菌治疗对GM检测的影响 抗真菌治疗使GM检测敏感性下降 确诊IPA的造血干细胞移植 未接受抗真菌治疗，GM试验的敏感度为87.5% 接受抗真菌治疗，敏感度为20% 应用卡泊芬净后，GM值会出现升高 BG检测的敏感性与抗真菌治疗无明显关系 抗生素治疗对BG检测和GM检测的影响 BG检测 假阳性与应用β内酰胺类抗生素无关 Antimicrob. Agents Chemother. 2006.50:3450–3453. GM检测 哌拉西林/他唑巴坦导致假阳性 IPA的诊断方法 BG检测 GM检测 烟曲霉可能阳性率低 二者联合可以提高检测的阳性率 BG检测用于肺孢子菌检测 BG是肺孢子菌包囊