分析chapter1绪论.pptVIP

 标准偏差（SD或S） 偏差（d）：测量值与平均值之差 重复性(repeatability):在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度；如把被测物浓度当作100%，至少测5次进行评价。 重现性(reproducibility)：不同实验室，不同分析人员测定结果的精密度。 数据要求：通常要求用于计算标准偏差的样品测量次数 n?5。 3、选择性和专属性 选择性（selectivity）：样品中有其它物质存在下精密测定待测物的能力。 用选择性系数来评价方法或仪器的选择性。选择性系数为在相同条件下测得的待测物当量浓度与共存物当量浓度之比。 专属性（specificity）：在其它成分可能存在下，所采用的方法能准确测定出被测物的特性。 它们都利用在测量样品中加入杂质和不加杂质时所测得的结果的区别来评价。 检测限（detection limit）：试样中的被测物在确定的实验条件下能被检测出的最低浓度或含量。 它分为仪器检测限，方法检测限和样品检测限三类。 4、检测限、定量限和灵敏度 信噪比法：是把已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。一般以信噪比（S/N）3∶1或2∶1时的相应浓度或注入仪器的量确定检测限。 仪器检测限：相对于背景，仪器能检测到的最少可靠信号，通常采用信噪比法。 （1）空白值＝0时；①测定背景10次以上，求出标准偏差σb。②将σb乘以三倍；③在工作曲线上求出3σb相对应的浓度Xb；即为样品的检测限。 （2）空白值不等于0；①测定背景10次以上，求出标准偏差σb ；②将σb 乘以三倍； ③ 将3σb加上空白时对应的检测值；④在工作曲线上求出③所对应的浓度Xb ；即为样品的检测限。 样品检测限:相对于空白可检测的最小样本含量；通常采用3倍空白标准偏差的方法来求出。 方法检测限：某方法可检测的最小浓度。通常采用外推法来求得。 具体做法： 在低浓度范围内测试3个浓度； 每个浓度水平测试多次（n5)，计算出标准偏差； 用线性回归法绘制标准偏差-浓度回归线； 回归线延长外推至和纵坐标的交点。 定量限（quantitation 1imit） 样品中的被测物能被定量测定的最低量，结果应具有一定准确度和精密度要求。 按1984年国际纯粹和应用化学联合会(IVPAC)规定：用仪器所测空白背景响应标准偏差（SD）的10倍为估计值，再用试验来确定定量限。 灵敏度(sensitivity):分析信号随组分含量变化而变化的程度，它与检测器的放大倍数直接相关。 灵敏度S实际上就是标准曲线的斜率，S值越大，方法的灵敏度越高。 线性（Linearity）：在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度呈正比关系的能力。 它通常用最小二乘法处理数据求得工作曲线的相关系数，用相关系数的平方来表示。 范围（Range）：一个定量分析方法的适用范围。 5、线性和范围 数据要求：至少需要五个浓度考察线形，需提供相关系数、列出回归方程和线性图。 耐用性：指测定条件稍有变动时，结果不受影响的承受程度。它是衡量实验室和工作人员之间在正常情况下实验结果重现性的尺度。 分析方法耐用性的测定是通过在不同的实验室内不同的实验者对同一样品的分别测试结果与正常条件下的结果进行比较，来确定该法的耐用性，或称粗放度。 6、耐用性 四、生物样品的预制备 4.1 生物样品的来源：动物、植物或微生物培养物。 4.2 目的：将原始样品预先适当处理成适合分析的 状态。 4.3 生物样品预制备的一般过程：材料选择→预处 理（洁净、切片、风干）→破碎→提取纯化 →浓缩→结晶→干燥→贮藏 4.3.1 生物样品的破碎 1. 玻璃匀浆器 它适用于培养细胞和软组织的匀浆； 松形锥用来上下抽挤样品； 紧形锥用来匀浆。 适合于各种动物、植物细胞、细菌和组织的破碎； 原理：利用超声波在液体中产生的空化效应； 空化效应（cavitation effect）在超声波的作用下引起介质和细胞内气体分子、气泡的振动以及气泡随后发生破裂形成空隙或空囊的作用； 2. 超声波细胞破碎机 它利用高压产生的挤压作用使细胞等材料破碎，适用于厚壁细胞、细菌和较浓样品的破碎，具有快速、方便和无噪声等特点。处理容量为1-50m1/次，有的可达20-150m1/次，且可连续进样，最大破碎压力为300MPa，使用电压380V。 3、高压细胞破碎机 4、高速组织捣碎机 组织捣碎机适用于较坚硬组织(如肌肉、心肌或果实等植物组织)的匀浆。 原理：利用电机的高速旋转(转速可达20000r/min)驱动转刀同时进行劈裂、碾碎、搅拌等过程。 注