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选修三课本疑难问题
植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 3.胚胎移植成功的基本条件 1)供体和受体同种且具有相同的生理环境 2)早期胚胎处于游离状态,为胚胎的收集提供了可能 3)受体对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥 4)胚胎与受体建立正常的联系,但遗传物质没有改变. * ??问题链? 1、抗虫棉的培育用到哪些操作工具? 2、运载体必须具备的条件? 3、常用的载体有哪些? 4、常用的受体细胞有哪些? 5、质粒是什么?来自哪里? 6、如何检测目的基因的导入和表达? 一、基因工程 7、工具酶的来源、特点及作用? 8、限制性内切酶只切外来的DNA而不切微生物自身的DNA为什么? 9、限制性内切酶能切RNA吗? 10、形成重组质粒时可用不同种酶切吗? 11、DNA连接酶连接后有几种连接产物? 12、如果受体细胞是大肠杆菌该如何处理? 13、获取目的基因的方法有哪些? 14、什么是反转录法?什么是人工合成法?(以胰岛素基因为例) 15、PCR技术分几个过程?PCR技术和DNA体外扩增的区别? 16、看两个粘性末端是否同种酶切要注意哪几个方面? 17、基因工程诞生的理论基础和技术保障? 18、基因工程操作的基本步骤? 二、植物的克隆 ?组织培养的相关问题: 1、植物组织培养的原理? 2、取材?培养基的成分? 3、植物组织培养的过程? 4、哪些阶段需要光、无菌或激素? 5、组织培养都是无性繁殖吗? 6、组织培养的最终目的都是植物体吗? 7、听说过人工种子和紫草素吗? 8、愈伤组织的特点?烟草为什么要进行悬浮培养?P22 四、细胞的全能性 1 、概念 2、 全能性大小: 3、高度分化的植物细胞表现全能性条件: 具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞,都具有发育成完整生物体的潜能。 受精卵生殖细胞体细胞 植物细胞动物细胞 细胞离体、一定的营养物质、激素和其他外界条件 1、植物克隆的理论基础和技术基础分别是什么?常用的技术手段有哪些? 2、植物组织培养的一般程序? 3、植物组培的培养基含有什么物质?属于什么培养基? 4、消毒的根茎叶上切取的组织块如何再生出新的植株? 5、如何从烟草的愈伤组织培养成的新的植株? 6、进行原生质体培养获得新的植株需要什么酶?在什么环境中去壁? 7、植物的几乎所有组织的细胞都可再生出新植株? 8、哪些植物的细胞诱导出的再生植株在多次继代培养后会丧失细胞全能性?哪些植物不会?说明什么? 9、长期培养中培养物胚胎发生和器官形成能力下降的可能原因? 10、胚性细胞的特征? 11、液体培养的 单个植物细胞发育成完整的植株需要经历哪几个过程? 12、有的植物可以在愈伤组织的基础上直接发育花器官。如风信子。 13、实现植物组培中的 形态建成通过调节什么来实现? 三、动物的克隆 ?5、动物细胞培养的原理? 6、原代培养,传代培养? 7、细胞株,细胞系? 8、为什么要用胰蛋白酶处理并分散成单个细胞 ? 9、细胞培养的条件? 10、动物细胞生长的特点? 无菌、无毒环境;适宜的温度和pH; O2;适宜的渗透压 贴壁;单层 ?思考: 2、取材? 1、动物细胞培养的培养基? 3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞? 4、结果?目的? 液体: 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。 大都取自动物胚胎或 出生不久的幼龄动物的器官或组织。 以免接触抑制,容易获得营养 细胞株和细胞系;提取分泌物,用于研究或检测有毒物质。 ?细胞株,细胞系的概念? 细胞系:可连续传代的细胞,分: 连续细胞系(大多具有异倍体核型,有的恶性细胞系,具异体致瘤性;有的获得不死性但保留接触抑制现象,不致癌) 有限细胞系:不能连续传代(通常为二倍体细胞) 细胞株:从原代培养物或细胞系中筛选出的具有特定性质或标记的细胞群,能繁殖50代左右。在培养过程中其特征始终保持。包括连续细胞株和有限细胞株 1、给小鼠注射抗原的目的是什么? 2、诱导其融合的方法有哪些? 3、融合后培养液中有几种细胞? 4、怎样筛选出杂交瘤细胞? 5、大量增殖杂交瘤细胞获得单克隆抗体的方法? 获得能产生抗体的B淋巴细胞 离心、振动、电刺激;聚乙二醇;灭活的病毒 五种 细胞的全能性 细胞株、细胞系 植株 培养结果 获得细胞或细胞产物 快速繁殖培育无病毒植株等 培养目的 营养物质、血清 营养物质、植物生长调节剂 培养基成分 液体培养基 半固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 植物细胞和动物细胞培养的比较 共同:无菌条件 制备单克隆抗体 或基因定位 获得杂种植株 用途 物理、化学方法(同左) 灭活的病毒 物理(离心、振荡、电刺激) 化学(聚乙二醇) 诱导方
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