09生物物理技术3章1.pptVIP

酸性Alizarin GarnetＲ的铝复合物的三种谱 A 吸收谱 B 激发谱 C 发射谱 化合物 溶剂 τ（ns） 清蛋白 100%(EtOH) 12.5 牛血清 水 4.6 人血清 水 4.5 α-胰蛋白酶 水 3.4 α-胰蛋白酶原 水 3.9 伊红 0.1mol/L NaOH 1.7 荧光素 0.1mol/L NaOH 4.6 几种物质的荧光寿命之值 化合物 溶剂 τ（ns） 人γ球蛋白 水 3.2 吲哚 水 2.7 吲哚乙酸 水 2.6 NADH 0.1mol/L NaHCO3 4.5 NADPH 0.1mol/L NaHCO3 4.3 奎宁 0.05mol/L H2SO4 0.5mol/L H2SO4 19.0 15.2 化合物 溶剂 τ（ns） 蕊香红 水 5.6 核黄素 水 4.2 血清素 水 2.7 色氨酸 水 2.6 酪氨酸 水 2.6 荧光偏振度（P） P=（I║―I┴）/（I║ + I┴） 其中I║表示起偏器和检偏器都是垂直取向（这时也与样品杯的垂直位置平行）时的荧光强度，I┴则为检偏器转动90°，使之与起偏器取向垂直时的荧光强度. 在不同的激发波长下所测得的P值不同. 一种荧光物质的P与激发波长的关系称为该物质的偏振谱. 利用偏振谱同样可辨认荧光物质中的吸收基团. 图为蕊香红在95%甘油水溶液中的偏振谱及其相应的吸收谱 蕊香红的吸收谱(a)与偏振谱(b) 荧光各向异性（A） 表示荧光的偏振在各个方向上不等同现象. A = （I║―I┴）/（I║ +2 I┴） 在分析复杂体系的荧光偏振时，A比P更方便. 荧光偏振与分子的转动、温度以及介质的粘度等因素有关. 探 剂 用 途 双层膜中的脂分子或蛋白质分子能在膜平面内进行扩散，一般称为侧向扩散. 这类研究对于了解膜的物理性质以及细胞内成分(如微丝与微管)间的关系有很大帮助. 4. 膜成分扩散速率的测定 荧光漂白恢复技术(fluorescence recovery after photobleaching，简称FRAP；或 fluorescence photobleaching recovery，简称FPR)，是能测扩散系数的一种较好的方法. 其原理是用荧光探剂先标记膜上欲研究的脂分子或蛋白质分子，然后用一束激光通过显微镜系统短时间照射细胞表面的某一小区(其直径为几个?m)，在强激光照射下，荧光分子将被破坏，以致此区见不到荧光. 但由于此区以外的荧光分子可以逐渐向此区内扩散，因此再用微弱激光观察时，可以见到此区的荧光强度逐渐恢复，其速率将与分子的扩散速率有关. 从测定结果来看，脂类分子的侧向扩散系数一般10-8cm2/s数量级，蛋白质分子扩散系数一般在10-10cm2/s或更小. FPR法为第一次直接测定膜上分子的扩散提供了定量手段. 1. 5-羟色胺及其拮抗剂和组织胺在心肌缺血中的作用的研究 2.尿毒症患者血浆5-HT变化意义 3.流行性出血热病毒对正常人骨髓细胞致病变作用 四、临床应用实例 问题的提出：为什么要做这项研究？ 无症状心肌缺血(SMI)和心绞痛是冠心病发生过程中的两个现象，内源性化学致痛物质、心血管活性肽、神经末梢释放的调节肽在其发生中起着重要作用. 有文献报道：?-内啡肽、缓激肽、腺苷等物质参与了SMI和心绞痛的发生. 镇痛物质?-内啡肽在SMI和心绞痛的发生中起不同作用. 5-羟色胺及其拮抗剂和组织胺在心肌缺血中的作用的研究 (中华心血管病杂志，1995，23(1)：40) 本研究期望从致痛的角度出发，探讨与疼痛调节有关的化学物质5-羟色胺(5-HT)和组织胺在SMI和心绞痛发生中可能存在的不同作用，并用5-羟色胺拮抗剂(赛庚啶)进一步观察5-羟色胺的致痛作用. 组织胺、5-HT均属单胺类物质，在神经末梢可引起伤害性刺激. 对象： 无症状心肌缺血(SMI)组 15例 无心绞痛发作史 心绞痛组 11例 有典型心绞痛症状发作 心电图运动试验阳性 以上病人经冠状动脉造影证实至少有一支冠状动脉管径狭窄50%. 方法 心电图运动试验: 采用常规次极量踏车运动试验.心肌缺血的诊断标准为运动中和运动后心电图出现ST段下垂型或水平型压低1mm，持续时间为2min. 根据运动中自觉症状分为SMI和心绞痛