CN107449745-CN201710580815-一种水中过氧化氢浓度的可见分光光度测定方法.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 107449745 A (43)申请公布日 2017.12.08 (21)申请号 201710580815.5 (22)申请日 2017.07.17 (71)申请人 华侨大学 地址 362000 福建省泉州市丰泽区城东 (72)发明人 邹景　蔡婳婳　 肖钧洋　刘鑫　 庞子君　苑宝玲　 (74)专利代理机构 厦门市首创君合专利事务所 有限公司 35204 代理人 张松亭　陈淑娴 (51)Int.Cl. G01N 21/31(2006.01) 权利要求书1页 说明书5页 附图1页 (54)发明名称 一种水中过氧化氢浓度的可见分光光度测 定方法 (57)摘要 本发明公开了一种水中过氧化氢浓度的可 见分光光度测定方法，是以过氧化氢酶催化过氧 化氢，以2-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸 为指示剂，通过浓度梯度的标准样反应后吸光度 的测试，拟合得到过氧化氢浓度相对于吸光度的 标准曲线及线性回归方程，然后通过测定待测样 品相同反应后的吸光度即可得知相应的过氧化 氢浓度，是一种操作简便、准确灵敏、绿色环保、 经济实用的仅需使用可见分光光度计即可在实 验室和现场快速检测样品中过氧化氢含量的方 法。本发明方法可广泛用于环保、日化及医疗行 A 业中，对各种经氧化、漂白或消毒的样品、雨水以 5 及特定芬顿体系中过氧化氢残余含量进行快速 4 7 9 而准确的检测。 4 4 7 0 1 N C CN 107449745 A 权　利　要　求　书 1/1页 1.一种水中过氧化氢浓度的可见分光光度测定方法，其特征在于包括以下步骤： 步骤一：制作标准曲线：将过氧化氢酶溶液和2-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸 溶液加入缓冲溶液中得混合溶液A，测定混合溶液A在特定吸收波长处的吸光度值，并校零； 分别向若干混合溶液A中加入相同体积不同浓度的过氧化氢标准溶液形成若干混合溶液B， 使该些混合溶液B形成过氧化氢的浓度梯度；对各混合溶液B进行氧化显色反应一段时间 后，测定显色后各混合溶液B在所述特定吸收波长处的吸光度值，记为b；以b作为横坐标，以 混合溶液B中过氧化氢的浓度作为纵坐标，建立标准曲线及其线性回归方程；其中，所述过 -1 氧化氢酶溶液活度为12500～500000units L ，所述2-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺 -1 酸溶液浓度为1～10mmol L ；所述过氧化氢酶溶液、2-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺 酸溶液、过氧化氢标准溶液的加入量与混合溶液B的体积比为0.002～0.04:0.01～0.1: 0.02～0.1:1； 步骤二：测定样品中过氧化氢含量：向所述混合溶液A中加入与所述过氧化氢标准溶液 加入量相同的待测过氧化氢样品形成混合溶液C，反应一段时间后，测定显色后混合溶液C 在所述特定吸收波长处的吸光度值，记为c；将c值代入到步骤一中所得标准曲线的线性回 归方程中，再通过所加入的待测过氧化氢样品与混合溶液C的体积关系计算得出待测样品 中过氧化氢的含量。 2.根据权利要求1所述的水中过氧化氢浓度的可见分光光度测定方法，其特征在于：所 述缓冲溶液是醋酸缓冲溶液、磷酸缓冲溶液或硼酸缓冲溶液，pH值为5～9。 3.根据权利要求1所述的水中过氧化氢浓度的可见分光光度测定方法，其特征在于：所 述氧化显色反应温度为0～35℃。 4.根据权利要求1所述的