CN107475319-CN201710940808-L甲硫氨酸的制备方法.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 107475319 A (43)申请公布日 2017.12.15 (21)申请号 201710940808.1 (22)申请日 2011.09.02 (62)分案原申请数据 201180073229.2 2011.09.02 (71)申请人 阿克马法国公司 地址 法国科隆布 申请人 CJ第一制糖株式会社 (72)发明人 G.弗雷米　P.巴里　金素影　 孙晟光　李相穆　 (74)专利代理机构 北京市柳沈律师事务所 11105 代理人 金拟粲 (51)Int.Cl. C12P 13/12(2006.01) 权利要求书1页 说明书9页 (54)发明名称 L-甲硫氨酸的制备方法 (57)摘要 本发明涉及使用生物合成工艺和特定的酶 促工艺制造L-甲硫氨酸的方法。更特别地，本发 明涉及在甲硫醇(CH SH)的存在下由L-甲硫氨酸 3 前体通过酶转化反应以高产率制造L-甲硫氨酸 的方法。本发明的方法使得能够选择性制造L-甲 硫氨酸，其可用在各种工业领域中，例如饲料和 食品添加剂、用于医疗用品、药物的原料等。 A 9 1 3 5 7 4 7 0 1 N C CN 107475319 A 权　利　要　求　书 1/1页 1.L-甲硫氨酸前体与甲硫醇的酶促转化以获得L-甲硫氨酸的方法，其中在反应容器中 在反应介质上方的甲硫醇分压范围为10kPA-180kPA、优选51kPa-180kPa、更优选51kPa- 160kPa、还更优选约80kPa-约160kPa、有利地约90kPa-约150kPa，例如CH SH分压为约 3 100kPa-150kPa，在反应温度下。 2.权利要求1的方法，其中所述反应温度范围为20℃-45℃、优选25℃-40℃、还更优选 30℃-40℃。 3.前述权利要求任一项的方法，其中所述L-甲硫氨酸前体为O-琥珀酰基高丝氨酸 (OSHS)和O-乙酰基高丝氨酸(OAHS)，且优选为OAHS。 4.前述权利要求任一项的方法，其中用于所述酶促转化的酶使用根据生物技术工艺的 基因表达制备。 5.前述权利要求任一项的方法，其中用于所述酶促转化的酶选自源自假单胞菌属菌种 (Pseudomonas  sp.)、色杆菌属菌种(Chromobacterium  sp.)、钩端螺旋体属菌种 (Leptospira sp.)、或生丝单胞菌属菌种(Hyphomonas sp.)的胱硫醚-γ-合酶或O-乙酰基 高丝氨酸硫化氢解酶或O-琥珀酰基高丝氨酸硫化氢解酶。 6.前述权利要求任一项的方法，其中反应的pH维持在约中性或稍微酸性的值，优选反 应介质的pH维持在6-7。 7.前述权利要求任一项的方法，其中加入辅酶，所述辅酶优选为吡哆醛-5-磷酸。 8.用于制备L-甲硫氨酸的方法，包括如下步骤： 1)制备产生L-甲硫氨酸前体的菌株且通过所述菌株的发酵产生L-甲硫氨酸前体； 2)根据权利要求1-7任一项的酶促转化方法将所述L-甲硫氨酸前体转化为L-甲硫氨 酸； 3)收集获得的L-甲硫氨酸。 9.权利要求8的方法，其中所述产生L-甲硫氨酸前体的菌株是能够积累L-甲硫氨酸前 体的原核或真核微生物菌株。 10.权利要求9的方法，其中所述菌株选自埃希氏菌属菌种(Escher