CN107475190-CN201710954117-一种脂肪SVF细胞临床级高效制备和冻存的方法及其用途.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 107475190 A (43)申请公布日 2017.12.15 (21)申请号 201710954117.7 A61P 29/00(2006.01) A61P 19/02(2006.01) (22)申请日 2017.10.13 A61P 19/08(2006.01) (71)申请人 上海莱馥医疗科技有限公司 地址 201114 上海市闵行区新骏环路138号 4幢5层501室 (72)发明人 李文荣　 (74)专利代理机构 上海信好专利代理事务所 (普通合伙) 31249 代理人 周乃鑫 (51)Int.Cl. C12N 5/0775(2010.01) C12N 5/071(2010.01) C12N 5/077(2010.01) A01N 1/02(2006.01) A61K 35/35(2015.01) 权利要求书2页 说明书7页 附图5页 (54)发明名称 一种脂肪SVF细胞临床级高效制备和冻存的 方法及其用途 (57)摘要 本发明公开了一种脂肪SVF细胞临床级高效 制备和冻存的方法及其用途，该制备方法包含： 步骤S1：在无菌条件下式采集脂肪样本，保存在 保存液中，加入洗涤液对脂肪样本进行预处理； 步骤S2：将预处理的脂肪样本离心，脂肪组织呈 黄色，取出脂肪组织并加入等体积已预热的消化 液，密封，在恒温条件下使脂肪组织和消化液混 合均匀，消化至无大块组织块或虽有大块组织块 但聚集大量脂质，离心；步骤S3：待步骤2离心结 束，去除上层脂质，加入洗涤液将沉淀重悬混匀， 过滤，再次添加洗涤液，离心，去除上清液，得到 A 脂肪SVF细胞。本发明制备方法采用的洗涤液和 0 消化液使得制备的脂肪SVF细胞的细胞数、细胞 9 1 5 活率及纯度大幅度上升，保证提取的SVF细胞在 7 4 7 临床治疗中的效果。 0 1 N C CN 107475190 A 权　利　要　求　书 1/2页 1.一种脂肪SVF细胞临床级高效制备方法，其特征在于，该制备方法包含： 步骤S1：在无菌条件下式采集脂肪样本，保存在保存液中，加入洗涤液对脂肪样本进行 预处理； 步骤S2：将预处理的脂肪样本离心，脂肪组织呈黄色，取出脂肪组织并加入等体积已预 热的消化液，密封，在恒温条件下使脂肪组织和消化液混合均匀，消化至无大块组织块或虽 有大块组织块但聚集大量脂质，离心； 步骤S3：待步骤2离心结束，去除上层脂质，加入洗涤液将沉淀重悬混匀，过滤，再次添 加洗涤液，离心，去除上清液，得到脂肪SVF细胞； 在步骤S1中，所述的洗涤液包含：生理盐水和人血白蛋白； 在步骤S2中，所述的消化液包含：人血白蛋白、0.9%生理盐水、氯化镁和混合胶原酶，所 述的混合胶原酶的质量：人血白蛋白的体积：0.9%生理盐水的体积为1mg：1mL：15mL。 2.根据权利要求1所述的脂肪SVF细胞临床级高效制备方法，其特征在于，在步骤S1中， 所述的保存液包含：氯化钠、青霉素和链霉素。 3.根据权利要求2所述的脂肪SVF细胞临床级高效制备方法，其特征在于，在所述的保 存液中，所述的氯化钠采用0.9%生理盐水；所述的青霉素的浓度为100μg/mL