CN107478836-CN201710517761-一种同时检测甲肝、乙肝和丙肝的试剂盒及其制备方法和用途.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 107478836 A (43)申请公布日 2017.12.15 (21)申请号 201710517761.8 (22)申请日 2017.06.29 (71)申请人 哈尔滨医科大学 地址 150081 黑龙江省哈尔滨市南岗区保 健路157号 (72)发明人 王海河　耿世龙　韩睿　李美琪　 赵玉莹　孟庆宇　 (74)专利代理机构 北京科龙寰宇知识产权代理 有限责任公司 11139 代理人 孙皓晨　马鑫 (51)Int.Cl. G01N 33/576(2006.01) 权利要求书2页 说明书6页 附图1页 (54)发明名称 一种同时检测甲肝、乙肝和丙肝的试剂盒及 其制备方法和用途 (57)摘要 本发明公开了一种同时检测甲肝、乙肝和丙 肝的试剂盒及其制备方法和用途。本发明利用免 疫胶体金层析技术，在借鉴其他层析检测技术的 基础上，将我国流行最为广泛的三种肝炎的检测 试纸条有机组合在同一检测试剂盒内，一次采血 可同时对三种肝炎作出诊断，检测灵敏度和特异 性与ELISA相似，但在所需血量、检测时间、检测 费用、操作技术等明显低于ELISA法，且检测过程 不需要任何检测设备，因此该检测试纸条易于在 大面积普查、急诊检查和广大基层医疗机构推广 应用，研究具有广大的市场需求，将产生重大的 A 社会和经济效益。 6 3 8 8 7 4 7 0 1 N C CN 107478836 A 权　利　要　求　书 1/2页 1.一种同时检测甲肝、乙肝和丙肝的试剂盒，其特征在于所述试剂盒包括分别用于甲 肝、乙肝和丙肝检测的纳米胶体金检测试纸条，所述的试纸条按照连接顺序依次包括样品 垫、金标垫、硝酸纤维素膜以及吸水垫，还包括位于下方的底衬、其中底衬的作用是提供组 装平台，样品垫提供了待测样品加入的位置； 用于甲肝检测的纳米胶体金检测试纸条中，所述硝酸纤维素膜上具有抗甲型肝炎病毒 多克隆抗体喷涂的质控线，以及甲型肝炎病毒抗原喷涂的检测线，金标垫上涂覆有胶体金 颗粒标记的甲型肝炎病毒抗原； 用于乙肝检测的纳米胶体金检测试纸条中，所述硝酸纤维素膜上具有羊抗鼠二抗喷涂 的质控线，以及乙型肝炎病毒单克隆抗体1喷涂的检测线，金标垫上涂覆有胶体金颗粒标记 的乙型肝炎病毒单克隆抗体2，乙型肝炎病毒单克隆抗体1以及乙型肝炎病毒单克隆抗体2 识别不同的抗原表位； 用于丙肝检测的纳米胶体金检测试纸条中，所述硝酸纤维素膜上具有抗丙型肝炎病毒 多克隆抗体喷涂的质控线，以及丙型肝炎病毒抗原喷涂的检测线，金标垫上涂覆有胶体金 颗粒标记的丙型肝炎病毒抗原。 2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，甲型肝炎病毒抗原、乙型肝炎病毒单克隆 抗体1和丙型肝炎病毒抗原分别以0.30μg/ml、0.24μg/ml以及0.20μg/ml的浓度喷涂到各自 硝酸纤维膜上的检测线上。 3.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，羊抗鼠二抗以0.3μg/ml、抗甲型肝炎病毒 多克隆抗体以0.2μg/ml HAV、抗丙型肝炎病毒多克隆抗体以0.2μg/ml的浓度喷涂到硝酸纤 维膜上的质控线上。 4.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，胶体金颗粒标记的甲型肝炎病毒抗原、乙 型肝炎病毒单克隆抗体2或丙型肝炎病毒抗原按照以下方法制备： 1)以柠檬酸三钠为还原剂，采用化学还原氯金酸制备纳米胶体金 (1)玻璃器皿的清洁：所有玻璃器皿过酸24小时后，流水冲洗去除残余酸，蒸馏水冲洗 4-5次，双蒸水冲洗3-4次