CN107385015-CN201710443872-GLUT1在人重组FGF21蛋白活性检测中的应用.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 107385015 A (43)申请公布日 2017.11.24 (21)申请号 201710443872.9 (22)申请日 2017.06.13 (71)申请人 西安医学院 地址 710021 陕西省西安市未央区辛王路1 号 (72)发明人 陈镝　赵玉峰　苏兴利　梁向艳　 魏兰兰　赵妍妍　谢荣　刘英光　 (74)专利代理机构 西安弘理专利事务所 61214 代理人 许志蛟 (51)Int.Cl. C12Q 1/68(2006.01) 权利要求书1页 说明书4页 附图3页 (54)发明名称 GLUT-1在人重组FGF21蛋白活性检测中的应 用 (57)摘要 本发明公开的葡萄糖转运体-1(GLUT-1)在 人重组FGF21蛋白活性检测中的应用，以诱导分 化的脂肪细胞为对象，采用定量反转录聚合酶链 式反应(qRT-PCR)检测经不同浓度的人重组 FGF21蛋白处理后脂肪细胞内葡萄糖转运体-1基 因表达水平的升高程度，进而确定人重组FGF21 蛋白的活性。本发明发现葡萄糖转运体-1基因表 达水平与所用人重组FGF21蛋白浓度之间存在良 好的量效关系，从而确定脂肪细胞内葡萄糖转运 体-1基因表达水平成为人重组FGF21蛋白活性检 测的新指标，该方法操作过程简单，对环境的要 A 求低，有很好的实用价值。 5 1 0 5 8 3 7 0 1 N C CN 107385015 A 权　利　要　求　书 1/1页 1.GLUT-1在人重组FGF21蛋白活性检测中的应用。 2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的GLUT-1与人重组FGF21蛋白的添加 浓度关系为：GLUT-1基因表达水平随人重组FGF21蛋白的添加浓度的增加而增大。 3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的GLUT-1的基因表达水平通过定量 PCR方法检测。 4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的定量PCR方法检测过程中，GLUT-1的 引物序列为： 上游引物：5’-GCC CCC AGA AGG TTA TTG A-3’； 下游引物：5’-CG TGG TGA GTG TGG TGG AT-3’。 5.用于判断人重组FGF21蛋白活性的GLUT-1，其特征在于，所述的GLUT-1基因表达水平 被人重组FGF21蛋白浓度上调，且呈剂量依赖性升高。 6.根据权利要求5所述的用于判断人重组FGF21蛋白活性的GLUT-1，其特征在于，所述 的GLUT-1为脂肪细胞内的GLUT-1。 2 2 CN 107385015 A 说　明　书 1/4页 GLUT-1在人重组FGF21蛋白活性检测中的应用 技术领域 [0001] 本发明属于葡萄糖转运体应用技术领域，具体涉及一种GLUT-1在人重组FGF21蛋 白活性检测中的应用。 背景技术 [0002] 肥胖和2型糖尿病已经成为威胁人类健康的主要疾病，与其相关的新药研制一直 是药物研发领域的热点。其中，蛋白类药物的开发表现出良好的前景。成纤维细胞生长因子 21(FGF21)是机体肝脏细胞和脂肪细胞等分泌的活性蛋白，FGF21重组蛋白可降低血脂、降 低血糖、减