CN107345245-CN201710443459-IL1β在人重组FGF21蛋白活性检测中的应用.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 107345245 A (43)申请公布日 2017.11.14 (21)申请号 201710443459.2 (22)申请日 2017.06.13 (71)申请人 西安医学院 地址 710021 陕西省西安市未央区辛王路1 号 (72)发明人 苏兴利　赵玉峰　魏兰兰　陈镝　 闫爱丽　梁向艳　赵妍妍　谢荣　 刘英光　 (74)专利代理机构 西安弘理专利事务所 61214 代理人 许志蛟 (51)Int.Cl. C12Q 1/68(2006.01) C07K 14/545(2006.01) 权利要求书1页 说明书4页 附图3页 (54)发明名称 IL-1β在人重组FGF21蛋白活性检测中的应 用 (57)摘要 本发明公开的白细胞介素-1β(IL-1β)在 人重组FGF21蛋白活性检测中的应用，以诱导分 化的脂肪细胞为对象，采用定量反转录聚合酶链 式反应(qRT-PCR)检测经不同浓度的人重组 FGF21蛋白处理后脂肪细胞内白细胞介素-1β基 因表达水平的升高程度，进而确定人重组FGF21 蛋白的活性。本发明发现白细胞介素-1β基因表 达水平与所用人重组FGF21蛋白浓度之间存在良 好的量效关系，从而确定脂肪细胞内白细胞介 素-1β基因表达水平成为人重组FGF21蛋白活性 检测的新指标，该方法操作过程简单，对环境的 A 要求低，有很好的实用价值。 5 4 2 5 4 3 7 0 1 N C CN 107345245 A 权　利　要　求　书 1/1页 1.IL-1β在人重组FGF21蛋白活性检测中的应用。 2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述IL-1β的基因表达水平与人重组FGF21 蛋白的添加浓度的关系为：IL-1β基因表达水平由于人重组FGF21蛋白的添加浓度的增加而 增大。 3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述IL-1β的基因表达水平通过定量PCR方 法检测。 4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述定量PCR方法检测过程中，IL-1β的引 物序列为： 上游引物：5’-AAA TAC CTG TGG CCT TGG GC-3’； 下游引物：5’-CTT GGG ATC CAC ACT CTC CAG-3’。 5.用于判断人重组FGF21蛋白活性的IL-1β，其特征在于，所述的IL-1β基因表达水平被 人重组FGF21蛋白浓度上调，且呈剂量依赖性升高。 6.根据权利要求5所述的用于判断人重组FGF21蛋白活性的IL-1β，其特征在于，所述的 IL-1β为脂肪细胞内的IL-1β。 2 2 CN 107345245 A 说　明　书 1/4页 IL-1β在人重组FGF21蛋白活性检测中的应用 技术领域 [0001] 本发明属于白细胞介素应用技术领域，具体涉及一种IL-1β在人重组FGF21蛋白活 性检测中的应用。 背景技术 [0002] 2型糖尿病严重威胁人类健康，其新药研制一直是科研和开发领域的热点，尤其以 蛋白类药物开发更为引人注目。在众多的候选蛋白中，成纤维细胞生长因子21(FGF21)是一 个研发热点