CN106970054-CN201710282845-用抗荧光干扰解耦算法提高蓝藻原位检测精度的方法.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 106970054 A (43)申请公布日 2017.07.21 (21)申请号 201710282845.8 (22)申请日 2017.04.26 (71)申请人 清华大学深圳研究生院 地址 518055 广东省深圳市南山区西丽大 学城清华园区 (72)发明人 蔡中华　类成龙　周进　蔡子文　 王嵘　何永红　姜玥璐　 (74)专利代理机构 北京纪凯知识产权代理有限 公司 11245 代理人 关畅　张立娜 (51)Int.Cl. G01N 21/64(2006.01) 权利要求书3页 说明书19页 附图14页 (54)发明名称 用抗荧光干扰解耦算法提高蓝藻原位检测 精度的方法 (57)摘要 本发明公开了一种利用抗荧光干扰解耦算 法提高蓝藻原位检测精度的方法。本发明方法依 托荧光分析法，以藻蓝蛋白作为检测蓝藻生物量 的主要色素指标，利用实验室内操作较为简单的 荧光分光光度计即可实现测量。利用本发明方法 可有效避免叶绿素a、叶绿素b与藻蓝蛋白之间的 相互影响，精确监测淡水中蓝藻生物量，为蓝藻 水华的预警提供较为精确的藻类生物量数据，为 后续蓝藻生物量检测传感器的设计提供理论基 础；还可用于荧光法检测荧光色素时最大程度避 免多种色素之间的干扰，为科学合理筛选荧光分 A 析中激发光波长与发射光波长提供理论依据；也 4 可在用荧光法检测水体中藻类色素浓度时，建立 5 0 0 多元校正反馈式分段线性检测模型，实现对色素 7 9 6 浓度的精确检测。 0 1 N C CN 106970054 A 权　利　要　求　书 1/3 页 1.一种检测淡水中蓝藻生物量的方法，包括如下步骤： (A1)采用三波长法对待测淡水水体进行检测，所述三波长法为分别用三组激发光波长 与发射光波长的组合对所述待测淡水水体进行荧光强度检测；所述三波长法中激发光波长 与发射光波长的三种组合为： 针对藻蓝蛋白：λ 为589～599nm，λ 为641～651nm，测得的荧光强度值记为C ； Ex Em 3 针对叶绿素a干扰：λ 为437～447nm，λ 为677～687nm，测得的荧光强度值记为C ； Ex Em 1 针对叶绿素b干扰：λ 为459～469nm，λ 为657～667nm，测得的荧光强度值记为C ； Ex Em 2 其中，λ 为激发光波长，λ 为发射光波长； Ex Em (A2)将步骤(A1)所得三种波长组合下的荧光强度值用数学模型进行处理从而获得淡 水中藻蓝蛋白的浓度，进而根据藻蓝蛋白的浓度与蓝藻细胞密度的关系计算得到所测淡水 中蓝藻的生物量； 所述数学模型由根据朗伯-比尔定律建立的分段线性模型与总体模型组成； 所述总体模型为在叶绿素a、叶绿素b与藻蓝蛋白三种色素荧光检测的线性浓度范围中 建立的单段线性模型，即色素的荧光强度与浓度的相关关系呈现为一段线性的模型； 所述分段线性模型为在叶绿素a、叶绿素b与藻蓝蛋白三种色素荧光检测的线性浓度范