细胞工程学复习资料 - 副本.docx

第一二章细胞工程：是指以细胞为对象，应用生命科学理论，借助工程学原理与技术，有目的地利用或改造生物遗传性状，以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。脱分化：又称去分化，是指分化细胞失去特有的结构和功能变为具有未分化细胞特性的过程。再分化：是指在离体条件下，无序生长的脱分化的细胞在适当条件下重新进入有序生长和分化状态的过程。微室培养：利用玻璃或塑料制作的小室进行细胞培养的技术第三章实验室基本组成：准备室、无菌室、培养室、分析室细胞培养主要设备：水处理设备、无菌设备、培养设备、观察分析、分离与保存设备等。灭菌方法：1、物理灭菌发（干热、湿热、射线处理、过滤） 2、化学灭菌法（消毒剂、抗菌素灭菌）消毒方法：物理灭菌法、化学灭菌法、使用抗生素第四章细胞培养：是指从体内组织分离细胞，模拟体内环境，在无菌、适当条件下使其生长繁殖的一种技术。细胞培养的对象可以是单个细胞或细胞群。分批式培养：是指细胞和培养基一次性加入到培养容器或生物反应器内进行培养，在培养过程中培养液体积不变，不添加营养成分，待细胞增长和产物积累到适当的时间，一次性收获细胞、产物和培养液的培养方法。连续式培养：是在细胞达到最大密度之前，以一定速度向生物反应器连续添加新鲜培养基，同时含有细胞的培养液以相同的速度连续从生物反应器流出，以保持培养体积恒定的培养方式。第五章无性繁殖：是指不经过生殖细胞结合的受精过程，由母体的一部分直接产生子代的繁殖方法。植物无性繁殖过程中器官发生方式：1、不定芽型（选取具有顶芽和腋芽的短枝无菌培养，诱导萌发成菌）2、器官型（直接从茎叶，鳞片等外肢体诱导不定芽，或者从带芽的体休眠器官再生成植株）3、器官发生型（诱导器官外值体产生愈伤组织，经过分化培养形成芽、根或胚状体再生成植株）4、胚状体发生型（植物器官、组织和细胞外植体经脱分化形成胚状体再生成菌的方式）5、原球茎型（兰属特有的器官发生方式，即外植体经培养产生原球茎，再直接长成植株）原球茎：是兰花种子萌发时产生的呈珠粒状、缩短的、类似嫩茎的器官，可萌发成苗。植物组织培养：是将植物器官、组织、细胞或原生质体等外植体材料在无菌条件下培养在人工培养基上，适当条件下诱发长成完整植株的一种技术植物组培优点：1.周期短，比啊与人工控制培养条件，繁殖快，经济效益高 2.占用空间少，不受地区、季节限制 3.繁殖珍惜，濒危苗木和突变体，是优良品种培育的有效途径 4.利于保持原有品种的特性植物组培应用：1.快速繁殖 2.种菌脱毒 3.新品种培育 4.次生代谢物的生产 5.种质资源保存6.理论研究植物培养基中常用的有机物成分：糖类（既可以作碳源，又可以维持渗透压）、氨基酸、维生素、醇类等。肌醇在糖类的相互转化、维生素和激素利用等方面具有促进作用，并能刺激细胞快速生长。常用的生长素：吲哚乙酸（IAA）、2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）等。生长素活力：2,4-D NAA IBAIAA常用的人工合成分裂素：6-苄氨基嘌呤（BA）、6-呋喃氨基嘌呤（激动素、KT）、分裂素活力：ZT ZIP BA KT赤霉素：广泛存在于植物体内，能促进细胞生长，与生长素一起可诱导细胞分化。激素控制植物器官分化模式图：外植体→（高浓度生长素2，4—D）→脱分化→愈伤组织→（高，细胞分裂素，生长素）→再分化→芽→（低，细胞分裂素，生长素）→分化根→定型植株生长素影响细胞壁的强度，促进细胞伸长和分裂。细胞分裂素则促进细胞分裂并影响分化方向。培养基配制：（自己看书，不知道要考的是什么。。。）富盐平衡培养基：MS，ER，BL 中盐培养基：Miller 高硝态氮培养基：B5，N6 低盐培养基：White常用的培养基：MS培养基（1962年为烟草细胞设计）、B5培养基（1968年为大豆根细胞设计）、White培养基（1943年为番茄细胞设计）、Miller培养基（1963年为一般组培设计）、N6培养基（1975年组培千本科植物花药）活性炭能防褐化，促生根。分化与调控方向：极性现象，细胞不均等分裂，位置效应，植物激素作用，细胞分化的调控机制脱分化：已有特定结构和功能的植物组织，在一定的条件下，其细胞被诱导改变原有的发育途径，逐步失去原有的分化状态，转变为具有分生能力的胚性细胞的过程。愈伤组织：脱分化后的细胞经过细胞分裂，产生无组织结构。无明显极性的松散的细胞团，称之为愈伤组织。器官发生途径：成熟细胞→愈伤组织→出根出芽→完整植株。外植体：主要指用于离体培养的植物或组织切断。（继代时将切割或不切割移入新培养基，该培养物也称外植体）植物组培的异质性：茎和叶做组培，遗传背景不一样。继代培养：指由最初外植体上切下初代新增殖的组织转入另一培养基继续培养的过程。植物组织培