(精选)【抗生素精品课件】精液的稀释教学课件.ppt

第四节 精液的稀释 ; 一、稀释液中各种成分及作用 ;（二）缓冲物质 ;（三）蛋黄和奶类 ;（四）抗冻害物质 ;（五）抗生素 ;（六）添加剂 ; 二、稀释液种类 ; ２.化学药品 所用糖类和盐类等物质，一般应采用化学分析纯的药品，配制时称量要准确，待药品充分溶解后经过滤，密封后进行消毒（隔水煮沸消毒、蒸汽或高压灭菌消毒）。在消毒过程中应缓慢加热，以防玻璃容器爆裂 ; ３.奶类 所用的奶类（包括全奶和脱脂奶、纯奶粉或脱脂奶粉等）必须是新鲜的，而且不应含其它物质如糖、果汁、微量元素或其他添加剂等，以防影响精液的渗透压，影响精子的存活。将一定量的鲜奶或充分的奶粉溶液，经过滤后，再置于92℃～95℃的水中进行10min灭菌，取出降温去奶皮后备用。 ;４.卵黄 取卵黄方法，是用最新鲜的鸡蛋，先将外壳洗净擦干，再用75%酒精消毒外壳，待酒精挥发后，轻轻破壳，尽量除去蛋清，再用灭菌注射器刺破卵黄，或者将卵黄倾倒于灭菌的滤纸或玻璃平皿内，以灭菌镊子挑破卵黄膜，轻轻倾出卵黄入灭菌量杯内，但注意不可混入蛋清和卵黄膜。 ;５.抗生素 常用抗生素为青霉素钾盐和双氢链霉素。抗生素必须在灭菌稀释液冷却后方可加入，氨苯磺胺也是一种常用的抗菌物质，将其溶于少量蒸馏水中（用量要计入总量），单独加热至80℃，待完全溶解后加入稀释液内。一般用量为每毫升稀释液内，加入青霉素500～1000IU、链霉素500～1000mg氨苯磺胺的用量占稀释液的0.3%。 ;（二）配制稀释注意事项 ; 四、精液的稀释倍数 ; 五、精液的稀释方法 ;　 对采集的新鲜精液尽快进行精液品质检测，如精子活率及精子密度等指标，以便确定精液的稀释倍数。稀释前，必须调整稀释液的温度与精液温度一致。一般是将精液和稀释液处于同一温度（30℃左右）条件下，待预热后进行稀释。 稀释方法是按确定的稀释倍数，将一定量的稀释液沿瓶壁或沿插入的灭菌玻璃棒，缓慢倾入精液瓶内，轻轻搅匀，勿剧烈震荡。若稀释倍数大，应先低倍后高倍，分几次进行稀释。以防精子环境突然改变，造成稀释打击。精液稀释均匀后，随即取出一滴稀释精液，镜检精子活率。若???现活率下降，说明稀释液或稀释处理不当。 　 ;第五节 精液的液态保存 ; 一、常温保存 ;（一）精液常温保存原理 ; 为使稀释液达到所需要的适合酸性环境，一般用下列方法调节： 　　1．向稀释液内充入一定量的洁净CO2气体，可行碳酸，变为弱酸形溶液。　　2．利用精子在自身代谢过程中长生的弱酸性环境。　　3．向稀释液内加入酸类物质，如已糖稀释液（caprogen）及一些植物酸汁。 ;（二）常温保存用的稀释液 ;２.猪精液常温保存稀释液。目前生产上常用的稀释液配方有： 　　（１）奶－卵稀释液 鲜牛（羊）奶100ml　卵黄8ml　青霉素20万IU 鲜奶需经92℃～95℃水浴消毒20min，等温度降至40℃，加入卵黄和青霉素，混合均匀。 　　（２）奶－糖－柠稀释液 鲜牛（羊）奶30ml　5%葡萄糖30ml　2.9% 柠檬酸钠30ml　卵黄10ml　青霉素 20万 IU 鲜奶消毒方法同上。 　　（３）葡－柠稀释液 葡萄糖5g　柠檬酸钠0.3g　 EDTA钠0.1g　蒸馏水加至100ml ; 3.绵羊精液常温保存稀释液配方： 奶类稀释液（取自健康母牛、母羊的新鲜奶），经水浴（92℃～95℃）消毒15min，降温至40℃以下，加入青霉素10～20万IU/100ml。葡－柠－卵稀释液 葡萄糖3g　柠檬酸钠1.4g 蒸馏水加至100ml。卵黄20ml 青霉素 10万IU 。;（三）常温保存方法 ;二、低温保存 ;（一）精液低温保存原理 ;（二）低温保存用的稀释液 ; 2.羊精液低温保存稀释液（１）绵羊精液低温保存稀释液，其配方为：10g奶粉加100ml蒸馏水配成基础液，取90%基础液和10%卵黄再加上1000IU/ml青霉素和1000μg/ml．双氢链霉素制成稀释液。（２）山羊精液低温保存稀释液，其配方为： 基础液：葡萄糖0.8g，二水柠檬酸钠2.8g，加蒸馏水100ml。 稀释液：基础液，80%；卵黄20%，青霉素1000IU/ml，双氢链霉素1000μg/ml。 ; 3.猪精液低温保存稀释液，其配方如下：基础液：二水柠檬酸钠0.5g、葡萄糖5g加蒸馏水至100ml。 稀释液：基础液97%，卵黄3%，青霉素1000IU/ml，双氢链霉素1000μg/ml。;（三）低温保存前的精液处理 ; 2.降温处理 　　稀释后的精液，为避免精子发生冷休克，必须采取缓慢降低温度方法，从30℃降至5℃～0℃时，其降温速率应以每分钟下降0.2℃左右为宜，整个降温过程大约需1～2h完成。一般缓