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第三章血液分析仪Hematologic Analyzers; 血液分析仪,临床血液一般检查最常用仪器。50年代，美国库尔特（W.H.Coulter）发明电子血细胞计数仪并申请专利。;第一节 检 验 原 理; 二、电阻抗法 ;2、白细胞计数和分类计数原理;经溶血素处理脱水后，血细胞体积大小发生 了变化！！！ 第一群（35～90fl）小细胞区：淋巴细胞 （体积最小）。 第二群（90～160fl）单个核细胞区，（中 间细胞）：单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱 性粒细胞、原始、幼稚细胞、异常细胞等。 第三群（160fl以上）大细胞区：嗜中性粒细 胞（体积最大）。 ;;三分群血液分析仪 正常白细胞分类模式图（直方图） ;三、光散射法血液分析仪检测原理 组合应用 电学 光学 细胞化学等 ;;;四、分光光度法;1、白细胞检测 （1）容量、电导、光散射（volume，conductivity， scatter, VCS）法; 体积 电导 光散射 ;VCS可显示3种细胞散点图 DF1 DF2 DF3;（2）电阻抗与射频法（能透入细胞内，测量核的大小及颗粒的多少）。 ; （3）激光与细胞化学法 过氧化物酶检测通道 嗜碱性粒细胞/分叶核检测通道。 ;（4）多角度偏振光散射（multi-angle polarized scatter separation of white cell, MAPSS）法 0°：前角光散射（1°～3°），可粗略测定细胞大小。 10°：狭角光散射（7°～11°），可测定细胞内部结构相对特征。 90°：垂直光散射（70°～110°），测定细胞核分叶情况。 90°：消偏振光散射（70°～110°），区分嗜酸性粒细胞与其他细胞。 ;;2、光散射法红细胞、血红蛋白检测原理 低角度(2°～3°)：测量红细胞体积。 高角度(5°～15°)：测定红细胞血红蛋白浓度。;3、血红蛋白检测原理 比色法;4、网织红细胞计数原理 ;第二节 血细胞分析仪检验参数 一、检测参数 中高档仪器检测参数： 20项左右或超过40多项。 二、相关参数的临床应用 ;一、血细胞直方图 横坐标为血细胞体积大小 纵坐标为不同体积细胞的相对频率。 ? ;1、白细胞直方图 正常白细胞直方图;2、红细胞直方图 （1）正常红细胞分布：50～200fl （2）异常???细胞直方图;3、血小板直方图 正常血小板直方图呈左偏态分布：2～30fl 分布，主要在2～15fl。 ; 第四节 仪器质量保证 一、 可比性 (comparability) 　　指血液分析仪测定结果，与常规方法所 测结果相比较。显微镜法是血细胞检验基础。 P＞0.05有可比性；P＜0.05无可比性。 结论：计数细胞越多、选用吸管、计数盘越多，计数结果接近真值。 　　实际工作中，镜检法很难达到此要求。 ? ;二、准确性 (accuracy) 准确性是指测定结果与真值一致性的程度。 ? 三、总重复性(overall repeatability) 指同一份标本多次测量的结果接近的程度。重复测定1份抗凝静脉血10次，计算CV值。 ;四、精密度 (precision) 　　批内（within-batch）精密度：同一批样本重复测定结果的评价。 　　批间(between-batch)精密度：对两批或两批以上样本重复测定结果的评价。 ;五、携带污染率(carry over) 　　连续测定1份高值样本3次（i1、i2、i3）再测定1份低值样本3次（j1、j2、j3） 携带污染率（%）＝（j1-j3）/（i3-J3） ;六、稀释效果 　　　指测定值与稀释倍数是否呈比例关系。 　　　线性关系范围越宽越理想。 　　P ＜ 0.01, 非线性相关； 　　P ＞ 0.05，未偏离线性。 ;稀释效果