(精选)中西医结合免疫学 第二十二章 免疫学检测技术的基本原理课件.pptVIP

4. 蛋白质芯片技术 快速、准确、高通量的检测技术 第三节 免疫细胞功能的检测（细胞免疫检测） 一、 免疫细胞的分离 葡聚糖-泛影葡胺密度梯度离心法 二、 免疫细胞功能的测定 1. T细胞功能测定 2. B细胞功能测定 (1) 抗凝 静脉血 (2) 加等量NS (4) 密度梯度离心 血浆 分离液 RBC PBMC PMN (3) 混匀后，缓慢加于分离液上 1. T细胞功能测定 （1）T细胞增殖试验 1）形态计数法：T细胞受到有丝分裂原刺激，出现体积增大、细胞形态不规则、胞质增多、细胞核松散并出现多个核仁等形态变化。 2）3H-TdR掺入法 3）MTT法 淋巴细胞转化试验（形态学示意图） 原理：人T细胞表面有PHA或ConA受体，T细胞在体外受PHA或ConA的刺激后能转化为体积较大、代谢旺盛、且能进行分裂的淋巴细胞，以此测定T细胞的功能。 PHA刺激 48~72小时 淋巴细胞增殖—3H-TdR掺入法 原理：将单个核细胞中加入PHA共同培养，在终止培养前8~15小时加入氚标记的胸腺嘧啶核苷（3H-TdR), 经β-液体闪烁仪检测淋巴细胞DNA的3H-TdR掺入量，推测淋巴细胞增殖的程度。 培养液 3H-TdR PHA 淋巴细胞 全血