考点二微生物的筛选和计数-宜宾一中.DOC

四川省宜宾市一中高2015级2017-2018学年上期生物第16周教学设计 编制人：廖小玉 审核：15级生物教研组 课题 《微生物的实验室培养与应用及植物有效成分的提取》一轮复习 课时 3 考点、知识点 1.微生物的分离和培养。2.培养基对微生物的选择作用。3.某种微生物数量的测定。4.微生物在其他方面的应用。 学生活动建议 教师活动建议 调整记录 1.培养基 (1)概念：(2)营养组成：(3)种类： 2.无菌技术 (1)含义：2)关键：(3)不同对象的无菌操作方法(连线) 3.大肠杆菌的纯化培养 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 →→→→ ②倒平板的方法及注意事项 (2)纯化大肠杆菌的方法 ①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。 ②纯化大肠杆菌的关键步骤：接种。 ③常用的微生物接种方法有两种a.平板划线法：b.稀释涂布平板法： (3)菌种的保存方法 考点二　微生物的筛选和计数 1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 项目 详细内容 实验原理 (1)能合成脲酶的细菌才能分解尿素(2)配制以尿素为唯一氮源的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌 数量统计 (1)直接计数法(显微镜下用特定细菌计数板或血细胞计2)间接计数法：稀释涂布平板法 实验流程 土壤取样→配制土壤溶液和制备培养基→系列稀释→涂布平板与培养→菌落计数 2.分解纤维素的微生物的分离 (1)纤维素酶 ①组成：纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶。 ②作用 纤维素纤维二糖葡萄糖 (2)纤维素分解菌的筛选 ①原理 　　　　　　 　纤维素分解菌 　　　　　　 　　　↓ →红色复合物红色消失，透明圈 ②筛选方法：刚果红染色法，即通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 ③培养基：以纤维素为唯一碳源的选择培养基。 ④实验流程 土壤取样：富含纤维素的环境 选择培养：用选择培养基培养，以增加纤维素分解菌的浓度 梯度稀释：制备系列稀释液 涂布平板：将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产透明圈的菌落 (3)分离纤维素分解菌所用的两种培养基比较 分离纤维素分解菌的实验中先用选择培养基，再用鉴别培养基。 ①选择培养基为液体培养基，以纤维素作为碳源和能源的微生物可以正常生长，而其他绝大多数微生物不能正常生长。 ②鉴别培养基含琼脂，为固体培养基，细菌可在培养基上形成肉眼可见的菌落。刚果红染色法应用的就是鉴别培养基。 3.结果分析与评 内容 现象 结论 有无杂菌污染的判断 对照的培养皿中无菌落生长 未被杂菌污染 培养物中菌落数偏高 被杂菌污染 菌落形态多样，菌落数偏高 培养物中混入其他氮源 选择培养基的筛选作用 牛肉膏培养基上的菌落数目大于选择培养基上的数目 选择培养基具筛选作用 得到2个或2个以上菌落数目在30～300的平板 操作成功 重复组的结果 若选取同一种土样，统计结果应接近 微生物计数的方法专项归纳(考纲最新添加内容) 1.间接计数法(也叫活菌计数法)：常用的是稀释涂布平板法。 计算公式：每克样品中的细菌数＝(C/V)×M [提醒]此种方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 2.显微镜直接计数法 计算公式：每毫升原液所含细菌数＝每小格平均细菌数×400×10 000×稀释倍数。 3.滤膜法 考点四　植物有效成分的提取 1.玫瑰精油的提取 2.橘皮精油的提取 3.胡萝卜素的提取 2.针对下图，请思考： (1)图甲、图乙分别为何种装置？ (2)图甲装置可分左、中、右三部分，其作用有何不同？图中a、b哪一个是进水口？哪一个为出水口？这与蒸气流方向________(相同、相反)？加热时为何常向液体中加入几片碎石或瓷片？___________________________________。 (3)图乙的安装及拆除顺序如何？为何常采用水浴加热？在烧瓶口安装冷凝回流装置的目的是 提示　(1)图甲为水蒸气蒸馏装置，图乙为萃取装置。 (2)整套蒸馏装置可分为左、中、右三部分，左边的部分通过加热进行蒸馏，中部将蒸馏物冷凝，右边的部分用来接收。图中a为出水口，b为进水口，这与蒸气流方向相反；加热时向液体中加入几片碎石或瓷片的目的是“防暴沸”。 (3)安装顺序是由下而上，拆除时相反。采用水浴加热的原因：有机溶剂都是易燃物，直接使用明火加热容易引起燃烧、爆炸。在烧瓶口安装冷凝回流装置的目的是防止加热时有机溶剂挥发。 6