红叶石楠组织培养.doc

红叶石楠组织培养 一．消毒灭菌 在超净工作台上以75%酒精浸泡10分钟，再转入0.15%升汞溶液中灭菌8～10分钟，倒去灭菌液，用预先准备好的无菌水冲洗4～5遍，沥干水后，切取茎尖分生组织，接种到诱芽培养基上。切取红叶石楠茎尖分生组织接种在BA 2.0mg/L＋IBA 0.2mg/L＋蔗糖30g/L＋琼脂5～7g/L，PH值5.5～5.8左右，经1.1kg/cm2高压消毒15～20分钟的MS培养基上，在温度25～30，光照强度1500～2000勒克司，每日光照12小时的培养条件下培养。接种后一周左右腋芽开如萌动，30～40天可伸长至2㎝左右，即可切下进入下一阶段的继代培养。　　继代培养　　当初代培养的红叶石楠腋芽长到2㎝左右时，切下接种在6-BA 1.0mg/L＋IBA 0.1mg/L＋蔗糖30g/L＋琼脂5～7g/L，PH值5.5～5.8左右，经1.1kg/cm2高压消毒15～20分钟的MS培养基上，在温度25～30，光照强度1500～2000勒克司，每日光照12小时，无根的试管苗经30～40天培养，丛生苗达到3㎝左右时，即可切割以扩大繁殖。一般第一次继代培养时增殖率2～3倍左右，经2～3次继代培养后增殖倍数可达到5倍左右，当继代苗达到一定数量时，可进行生根培养。　　生根培养　　当红叶石楠无根苗长至2～3㎝时，可转移到生根培养基上培养。生根培养1/2MS＋0.2～0.3mg/L的NAA＋0.3%活性炭的基本培养基上，在温度25～28，光照强度1500勒克司，每日光照10～12小时，一般一周左右可见红色根形成，经30～40天培养后，当根长至2～3㎝时，即可进行炼苗移栽。　　炼苗及移栽　　红叶石楠组培苗炼苗可先在温度20～30之间的温室内拧松瓶盖放置3～5天，然后进行温床过渡移栽。过渡苗床（即温床）可建在普通单体的塑料大棚内，床宽1.2m左右，床四周砌高30㎝，床底整平，有条件的可加地热线，上铺15～25㎝的栽培基质。基质为蛭石:珍珠岩＝1:2。温床做好后要严格消毒，方法是用1000倍敌克松溶液浇透整床基质，再用0.15%高锰酸钾喷洒苗床表面及四周，24小时后即可移栽小苗。移栽时，将幼苗从瓶内取出，用清水将根部琼脂清洗干净，同时应尽量减少伤根。种入苗床后，选择清洁水浇灌，移栽当天喷施0.3%的磷酸二氢钾溶液，并喷施800～1000倍的甲基托布津或1000倍多菌灵药液，以后每隔一周喷施一次，连续3～4次。移栽初期要特别注意保持苗床和空气湿度，一般需全封闭管理一周左右，再半封闭管理二周左右，根据情况在25天左右可以逐步通风，并除去覆盖物。在春秋季节移栽时，需遮荫三周左右；冬季移栽时，遮荫二周左右，但关键是控制苗床温度在15～30之间才有利于成活，如环境温度超过35就不宜移栽。一般过渡移栽50天后，小苗就可上盆移栽，春季可直接移入大田。　　大田移栽的时机应根据小苗生长情况和天气情况而定，一般过渡苗长至5㎝时就可移栽，但最好待在小苗长到10㎝以上移栽，成活率可达95%以上。大田移栽后的管理和扦插繁殖的小苗移栽后管理一样。2010-11-14 （注：小组人员 曾锋 ） 王林 吴丰呈 陈佳敏 2