(精编)【医学教学课件】蛙的系列实验教学课件.pptVIP

蛙的系列实验 动物学教研室 顾 勇 实验目的 1.学习坐骨神经——腓肠肌标本的制备技术。 2.了解蛙微循环区各类血管血流特点及某些药物对血管舒缩活动的影响。 3.了解脊髓反射和反射弧的组成及反射弧各部位的作用。 4.了解迷路在维持动物姿势平衡和正常运动中的作用。 5.初步培养学生合理利用实验材料进行综合实验的能力。 1．蛙类心跳起源的分析。 2．蛙类微循环的观察。 3．脊髓反射和反射弧的分析。 4．蛙一侧迷路破坏的效应。 5．蛙类坐骨神经－腓肠肌标本的制备。 实验内容（供选择） 材料与用品 （一）材料 活蛙（限1人1只蛙）。 （二）用品 显微镜、解剖器具、毁髓针、玻璃针、蜡盘、有孔橡皮蛙板、铁支架、细铁丝钩或蛙嘴夹、电炉、温度计、秒表、注射器、小烧杯、大烧杯、滴管、培养皿、大头针、纱布、棉球、细线、小滤纸片。0.65%生理盐水、0.01 %去甲肾上腺素、0.01%组织胺、20%氨基甲酸乙酯、1％可卡因、任氏液、0.5％、1％和2%硫酸溶液、瑞氏染液、蒸馏水、冰水、水。 5．斯氏结扎 (1)用眼科镊在左右动脉干下穿一线备用，将心尖翻向头端，暴露心脏背面，然后将放置在动脉干下的那条线在窦房沟处作一结扎（图16－3），即为斯氏第1结扎（图16－2A）：观察心脏各部分搏动节律的变化，可见心房、心室立即停止搏动，而静脉窦仍继续搏动，用秒表记录静脉窦搏动频率。待心房和心室恢复搏动后，分别记录它们的搏动频率。 (2)然后在冠状沟处穿线做第2结扎，即斯氏第2结扎（图16－2B）。这时心房和静脉窦仍继续搏动，心室则停止搏动。待心室恢复搏动后，记录心脏各部位的搏动频率。 **根据试验结果，分析蛙心脏不同部位节律性的高低，正常情况下心脏节律活动的顺序。 （三）蛙类徽循环的观察 蛙的肠系膜、舌及后肢足蹼等部位的组织较薄，适于用来制备微循环观察标本。 1．蛙肠系膜标本的制备 (1)取蛙I只，称重后于其皮下淋巴窦注人20%氨基甲酸乙酯(2－3 mg /g体重)，约10－15min，动物即进入麻醉状态。 (2)将已麻醉的蛙背位固定于蛙板上，使其身体左侧紧靠蛙板上的小孔。用镊子轻轻提起左侧腹壁， **不要将内脏也夹起。再用剪刀在腹壁上剪一长约1cm的纵向切口。轻轻拉出小肠拌，将肠系膜展开过蛙板上的小孔，并用大头针固定在蛙板上（图16－4）。 **小肠拌不能绷得太紧，以免拉破肠系膜或阻断血流，另需要适量任氏液润湿肠系膜，以免干燥，影响血液循环。 2．若用蛙舌或足蹼作观察标本，则用大头针将麻醉的蛙固定在蛙板上，使其鼻端离板孔0.5 cm，拖出舌头，拉紧过孔，并用大头针将舌缘固定在蛙板孔的周缘；或将蛙两足趾展开，使趾蹼过孔，用大头针固定。 3．观察 将标本置低倍镜下观察。可见有许多纵横交错粗细不等的血管。根据血管的粗细和分支情况、血流方向和血流特征，可区别小动脉、小静脉和毛细血管。 (1)动脉血流的观察 在镜下移动标本直到发现一段较粗血管内的血液流向2分支血管，这段血管就是小动脉。注意观察管中血流速度快，不均匀，有搏动，有轴流现象（血细胞在血管中央流动）。 (2)静脉血流的观察 移动标本真到发现血流由2支血管汇人1支血管，这2个分支血管就是小静脉，观察管内血流有无搏动和轴流现象，比较动脉和静脉内血流的速度。 (3)毛细血管血流的观察 寻找管径最小、透明、近乎无色的血管即毛细血管。在高倍镜下可见一串串红细胞以单个排列形式在管内移动，或红细胞断断续续地单个移动。血流速度如何？有无搏动？ ** 3类血管的形态和血流特点与其生理功能有何联系？ 4．血管对药物的反应 (1)滴加几滴0.01%去甲肾上腺素于肠系膜上，持续观察各血管管径及血流的变化。出现变化后立即用任氏液冲洗。 (2)待血流恢复正常后，再滴加几滴0.01％组织胺于肠系膜上，观察血管及血流的变化。若用蛙蹼作为观察标本，则难以观蔡血管对药物的反应。 （四）蛙类一侧迷路破坏的效应 1．将蛙放在桌面上和水盆中，观察其正常的姿势和运动。 2．破坏蛙的一侧迷路并观察其效应。 (1)用纱布包住蛙躯干部，使其腹面向上握于左手中，翻开下颌用左手拇指压住。右手持手术刀在颅底口腔粘膜作一横切口，分开粘膜，即可看到“十”字形的副蝶骨。迷路即位于副蝶骨横突的左右两旁（图16－5）。 (2)用手术刀削去一侧横突的骨质，可看到粟粒大小的小白点，此处即是内耳囊。将毁髓针刺人内耳囊2－3mm，勿刺得太深，以免损伤中枢神经，转动针尖，搅毁其中的迷路。 (3)静待数分钟后，观察蛙在桌面上的姿势和运动；将蛙放在