(精编)【医学教学课件】致畸试验教学课件.pptVIP

毒理学基础实验课 致 畸 试 验  哈尔滨医科大学公共卫生学院 卫生毒理学教研室 任 锐 某些化学物进入妊娠母体后，能对胚胎发育产生毒害作用，致使胎仔的器官形态结构发生缺陷而表现为畸形。这样的物质称为化学致畸物或致畸原。致畸试验是通过在致畸敏感期（器官形成期）对妊娠动物染毒，在妊娠末期观察胎仔有无发育障碍与畸形来评价受试物致畸作用的方法，对于全面评价化学毒物的毒性具有重要意义。 妊娠母体接触某些具有致畸作用的化学物质，对于处在器官形成期的胚胎发育可产生不良影响，使胎仔形态结构发生缺陷而呈现畸形。因此，可以通过观察妊娠母体在敏感期接触受试物后胚胎及胎仔的发育状况来评价某种化学物有无致畸作用。 基本原理 手术用剪刀、无齿镊子、单面刀片。 上皿天平（感量0.1g）。 游标卡尺。 玻璃标本瓶、平皿。 实体显微镜。 器材 剂量分组 在确定剂量时，一方面要求找出最大无作用剂量以及致畸阈剂量；同时还要保持母体生育能力，不致大批流产和过多胚胎死亡和避免母体死亡。一般应先进行预试。根据预试结果可以确定正式试验剂量。 应最少设3个剂量组，另设对照组。一般最高剂量不超过LD50的1/5～1/3，低剂量可为1／100～1／30 。 动物交配处理 将性成熟雌雄动物按雌雄1:1或2:1的比例同笼交配。每日将已确定受孕雌鼠随机分入各剂量组和对照组。（每组至少需要有20只怀孕雌鼠存活） 染毒 在受孕大鼠器官形成期给予受试物。 阴栓 显微镜下观察到的精子 一般状况：进食、状态 称量体重：3天称量1次 孕鼠状况观察 胎仔检查 自然分娩前1～2日将受孕动物处死剖腹，取出子宫及活产胎仔，记录死胎及吸收胎。一般大鼠在受孕后第19～20天，小鼠第18～19天。 （1）着床数 活胎数：外观，光泽 死胎数：早死胎，晚死胎 子宫数 黄体数 各类胎仔特征 胎仔类别 颜色 光泽 器官形成 自然活动 对机械刺激反应 胎盘 活胎 肉红 有 完全 有 有运动 色红，较大 晚期死胎 灰白 无 完全 无 无运动 灰红，较小 早期死胎 暗紫 无 不完全 无 — 棕黑 吸收胎 暗紫带白点 无 不能辨认 — — 不能辨认 摘出子宫连同子宫内胎仔一起称重，称为“窝重”。剖开子宫及羊膜，逐个钳住剪断脐带，取出胎仔，剥离胎盘，称胎盘重量。 窝重=仔鼠重+羊水+胎盘 净增重=20d重-6d重-窝重 （2）窝重 头部 躯干 四肢 无脑 脊柱裂 前或后肢形成不全 脑膨出 脊髓膨出 多指（趾） 小脑 胸骨裂 少指（趾） 颌面裂 腹裂 畸形手（足） 开眼 所肛 并指（趾） 单耳鼻 卷尾 短指（趾） 无耳 短尾 无颚或小颚 无尾 兔唇 无颌或小颌 （3）外观 首先观察是否有水肿、皮下淤血，然后从颈、胸腹、脊背到前后肢仔细观察记录 体重、身长、尾长 （4）一般发育指标的测量 （5）骨骼检查 徒手切片法 毒理学基础实验课