实验6维生素C含量的测定.pptVIP

1 实验目的 2 实验原理 3 仪器设备、材料和试剂 * * 生物化学实验 生物基础课实验示范中心 田国政 （多媒体课件） 湖北民族学院生物科学与技术学院 实验6 维生素C的定量测定 实验类型：基础验证型 实验学时：2学时 　　1.1 了解维生素C的测定原理和方法 1.2 加深理解维生素C的理化性质 还原型抗坏血酸能还原染料 2.6－二氯酚靛酚钠盐（DCPIP） ，本身则氧化成脱氢抗坏血酸。在酸性溶液中， 2.6－二氯酚靛酚钠离子呈红色，被还原后变为无色。溶液中的维生素C已全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液变成粉红色。所以，当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化，此时为滴定终点。 还原型Vc 氧化型Vc + + = 2,6-二氯酚靛酚 氧化型，粉红色 2,6-二氯酚靛酚 还原型，无色 3.1 仪器 柑橘 松针 3.2 材料 3.3 试剂 2% 草酸溶液 ：取2g草酸溶于100mL蒸馏水中。 1% 草酸溶液 ：取1g草酸溶于100mL蒸馏水中。 标准Vc溶液（ 0.1mg.mL-1）：精确称取10mgVc，以1%草酸溶解并定容到100mL。储存到棕色瓶中。 0.2mg/mL 2.6－二氯酚靛酚钠溶液：将50mg2.6－二氯酚靛酚钠溶解于约200mL含有52mg NaHCO3的热蒸馏水中，冷却后定容到250mL，储存在棕色瓶中，保存在低温下。2.6－二氯酚靛酚钠不稳定，必须在一周内用完。 用前必须标定到1mL2.6－二氯酚靛酚钠相当于0.088mg抗坏血酸。 4 方法步骤 4.1 称取水果和蔬菜样品10g，放在研钵中加入2%草酸溶液约2ml研碎。通过漏斗将研碎的样品倒入一只100ml容量瓶中，最后用2%草酸定容至刻度，过滤，滤液备用。 4.2 染料的标定：取10ml标准抗坏血酸溶液至蒸发皿中，以2，6-二氯酚靛酚溶液滴定成粉红色，并以在30s内不退色为终点。计算1ml染料相当于抗坏血酸的毫克数（重复3次，取平均值）。 4.3 取滤液10ml于蒸发皿中，用已标定过的2，6-氯酚靛酚溶液滴定至粉红色，并且以在30s内不退色为终点，记下染料的用量（重复3次，取平均值）。 5 实验结果 式中：m：100g样品中含量维生素c的质量，mg； y1：滴定空白所用染料体积，ml； y0：滴定样品所用染料体积，ml； A：1ml染料溶液相当的抗坏血酸的质量， B：样品的质量，g； X：滴定时吸取样品溶液的体积，ml； Z：样品溶液定容后的总体积，ml。 6 思考题 为了保证维生素c含量的测定应注意些什么？ *