产胆甾-4-烯-3-酮菌株的筛选、鉴定及其发酵优化.pdfVIP

产胆甾-4-烯-3-酮菌株的筛选、鉴定及其发酵优化 细胞生物学 专业 研究生 赵超 指导老师 宗浩 摘要 甾体化合物作为是仅次于抗生素的第二大类药物。近年来,在医 疗领域的应用范围不断扩大,被广泛用于治疗风湿病、心血管、胶原性病症、 淋巴白血病、人体器官移植、抗肿瘤、细菌性脑炎、皮肤病、内分泌失调、 老年性疾病等。 胆甾-4-烯-3-酮，作为胆固醇的氧化产物，可作为减肥食品添加剂或抗 高脂血症药物抑制人体内脂肪的积累防止发生肥胖及相应的一些症状,而且 不会出现临床上的异常现象和致癌特征。在治疗肝病和防止皮肤角质化抵抗 衰老也具有一定的价值，还可作为合成一些药物激素的重要原料。其合成方 法有化学合成法和微生物转化法。 首先，从采集获得土样中，筛选出可将胆固醇转化为胆甾-4-烯-3-酮且 产量较好的菌株。通过生理生化鉴定和18SrDNA基因全序列分析确定该菌株 为镰刀菌属（Fusarium sp. ）可能为尖镰孢菌。 其次，对发酵所得产物进行分离纯化得到结晶，对产物进行 HPLC、质 谱、核磁、红外、熔点检测等分析。证实所得产物为胆甾-4-烯-3-酮且纯度 达到99.8%。 最后，对发酵培养基进行优化，发现碳源对胆甾-4-烯-3-酮产率影响最 大，其次是氮源及金属离子。对发酵条件进行优化去的最佳发酵条件为温度 30℃，pH7.0，接种种龄 36h，接种量 7.5%，摇床转速 200，发酵培养时间 84h。 I 关键词 胆甾-4-烯-3-酮；筛选；鉴定；发酵优化 II Screening indentification and fermentation optimize of the bacterium produceing cholest-4-en-3-one Major ：Cell Biology Master of Science Candidate ：Zhao Chao Supervisor： Zong Hao Abstract:In recent years,steroidal compounds as the second medicine only to antibiotic drugs,has been widely applied to the area of medical treatment.It has been widely used to treat rheumatism,cardiovascular, collagen disease, lymphatic leukemia, organ transplantation, anti-tumor, bacterial encephalitis, skin diseases, endocrine disorders, age-related diseases and so on. Cholest-4-en-3-one,as cholesterol oxidation products,could be slimming food additives or anti-hyperlipidemic drugs which can inhibits the accumulation of body fat, prevent the occurrence of obesity and the corresponding symptoms.It is valuable in the treatment of liver disease and the prevention of resist