尿液外泌体分离纯化试剂盒.PDF

尿液外泌体分离纯化试剂盒 货号：Exo120S(2 次) Exo120(10 次) Exo120L(40 次) 储存：直立，室温避光保存。（通风、凉爽）。 有效期：12 个月 应用：从尿液中分离外泌体 规格：每个反应能分离出50-200 µL 外泌体，这100-200 µL 外泌体可分离得到150~400 μg 外 泌体蛋白和50~200 ng 外泌体RNA 。 介绍：该试剂盒可以从尿液中分离纯化高纯度的外泌体。仅用于科学研究。  简单易用：无需超高速离心机离心（时间2h ）；  高回收率：得到的外泌体是传统离心或其它试剂盒的 10 倍。  节约成本：相比于磁珠法；  高纯度：分离的外泌体纯度高达95% 以上；  形态完整：分离的外泌体保持完整的形态和功能； 从1 mL 尿液获得的高纯度外泌体可用于下游应用：电镜研究，外泌体标记，外泌体亚群分析， 外泌体miRNAs 的qRT-PCR 分析，外泌体蛋白凝胶电泳等。 产品组份：（室温保存） 体积 组份 Cat. #: EXO120S Cat. #: EXO120 Cat. #: EXO120L Solution A (blue) 0.5 mL 2.5 mL 10 mL Solution B 0.5 mL 2.5 mL 10 mL Solution C 2.0 mL 10 mL 10 mL x 4 PureExo® Column 2 10 40 *每次使用后立即盖好瓶盖避免蒸发。 反应体积 （重要）： 尿液体积 A/B/C 混合液 = 溶液 A + 溶液 B + 溶液C 1 mL (最小) 0.500mL = 0.083 mL + 0.083 mL +0.334 mL 2 mL 1.000 mL = 0.166 mL + 0.166 mL + 0.668 mL 3 mL (最大) 1.500 mL = 0.250 mL + 0.250 mL + 1.00 mL *每个反应尿液的最大体积为3 mL。尿液体积超过3 mL 可能引起分层不明显和柱子堵塞。 分离流程 （处理2 mL 尿液样本） 1. 样本制备：2 mL 尿液样本，4 ℃条件3000x g 离心15 分钟，弃去碎片。 注：不做这步，可能会导致步骤14 中柱子堵塞。 北京诺为生物技术有限公司 电话：010 E-mail: nwbiotec@ 地址：北京市海淀区上地信息路15 号608 1 2. 不要打破“团”，将2 mL 上清液转移到新试管1 中并置于冰上。 3. 在另一支新试管2 中依次加入溶液A 、B 、C ，配成A/B/C 混合液。 （溶液A: 0.166mL ； 溶液B ：0.166 mL ； 溶液C: 0.668 mL ） *取完试剂后立即盖好盖子。处理不同体积的尿液样本，参照上一页反应体积表。 4. 涡旋试管2 （A/B/C 混合液）10 秒，得到均一的溶液。 5. 将试管2 中所有的A/B/C 混合液 （1 mL ）转移到试管1 中（与2 mL 尿液混匀）。 6. 盖好试管1 试管盖，涡旋混匀30 秒，然后4 ℃孵育1 h 。 7a. 现在，混合液分为三层：吸取上面蓝色层并弃掉，不要打破中间蓬松层。然后进入步骤8。 上面蓝色层 中间蓬松层（外泌体富集层） 下面无色层 7b. 有时，只能出现两层，即上面蓝色层和下面白色云状层（如下图所示）。小心弃去蓝色层， 进入步骤8. 弃去