紫外吸收光谱分析法幻灯片.pptVIP

紫外-可见分光光度计 * 二、紫外-可见分光光度计的类型 1.单光束 简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。 2.双光束 自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂，价格较高。 * 3.双波长 将不同波长的两束单色光(λ1、λ2) 快束交替通过同一吸收池而后到达检测器。最后由显示器显示出两个波长处的吸光度差值ΔA(ΔA=A?1-A?2)。对于多组分混合物、混浊试样（如生物组织液）分析，以及存在背景干扰或共存组分吸收干扰的情况下，利用双波长分光光度法，往往能提高方法的灵敏度和选择性。无需参比池。当△?=1～2nm，两波长同时扫描即可获得导数光谱。 紫外-可见分光光度计 * 三、分光光度计的校正 紫外-可见分光光度计 光 路 图 * 仪器 紫外-可见分光光度计 第五节 紫外吸收光谱的应用 一、 定性分析 主要应用:有机和化合物的定性分析和结构分析。 依据：吸收光谱的形状、吸收峰的数目和位置及相应的摩尔吸光系数，而最大吸收波长及相应的是定性分析的最主要参数。 1. 比较吸收光谱曲线法 在相同的测量条件下，测定和比较未知物与已知标准物的 吸收光谱曲线，如果两者的光谱完全一致，则可以初步认为 它们是同一化合物。为了能使分析更准确可靠，要注意如下 几点： a. 尽量保持光谱的精细结构。 b. 吸收光谱采用lgA对λ作图。 c. 往往还需要用其它方法进行证实，如红外光谱等。 * 定性分析 ②. 标准谱图比较法 利用标准谱图或光谱数据比较。常用的标准谱图有以下 表中的四种： [1] Sadtler Standard Spectra(Ultraviolet),Heyden,London,1978. 萨特勒标准图谱库，共收集了46000种化合物的紫外光谱。 [2] R.A.Friedel and M.Orchin,“Ultraviolet and Visible Absorption Spectra of Aromatic Compounds”,Wiley,New York, 1951. 本书收集了597种芳香化合物的紫外光谱。 [3] Kenzo Hirayama：“Handbook of Ultraviolet and Visible Absorption Spectra a of Organic Compounds.”,New York,Plenum,1967。 [4] “Organic Electronic Spectral Data”。 ③. 计算不饱和有机化合物最大吸收波长的经验规则 * 紫外吸收光谱的应用 二、有机化合物分子结构的推断 1. 推测化合物所含的官能团 如果一个化合物在220～800nm分为内无吸收峰，它可能是酯肪族碳氢化合物、胺、醇、羧酸、氯代烃和氟代烃，不含双键或共轭体系，没有醛、酮或溴、碘等基团。 如果在210~250 nm有强吸收峰（ε?104），表明含有两个双键的共轭体系（K带）。如1,3-丁二烯，λmax为217nm，εmax为21,000；共轭二烯：K带（?230 nm）；???不饱和醛酮：K带?230 nm 。 若260～350nm区域有很强的吸收带，则可能有3~5个双键的共轭体系，如癸五烯有五个共轭双键，λmax为335nm，εmax为118,000。 R带?310~330 nm * 推测化合物所含的官能团 250~300 nm 有中等强度的吸收峰（ε=200~2000），芳环的特征 吸收（具有精细解构的B带）。(在184nm附近有强吸收带(E1带)，在204nm附近有中强吸收带(E2带) ，在260nm附近有弱吸收带且有精细结构(B带)，是苯环的特征吸收，等等)。 如在270～300nm处有弱的吸收带，且随溶剂极性增大而发生蓝移，就是羰基n－π*跃迁所产生R吸收带的有力证据。 共轭体系会产生很强的K吸收带，通过绘制吸收光谱，可以判断化合物是否存在共轭体系或共轭的程度。 * 有机化合物分子结构的推断 2. 异构体的判断 ①. 顺反异构体的判断 * 肉桂酸 (顺) λmax＝280nm (反)max＝295nm εmax =13500 εmax =27000 1,2-二苯乙烯 顺：λmax=280nm； εmax=10500 反：λmax=295.5 nm；εmax=29000 （空间位阻，影响共平面） 异构体的判断 ②.互变异构体的判断 * 乙酰乙酸乙酯互变异构 酮 式：λmax=204 nm；无共轭 烯醇式：