专题2.1 微生物的实验室培养（讲）-2017-2018学年高二生物同步精品课堂（基础版）（选修1）（讲）（解析版）.docVIP

选修1专题2课题1微生物的实验培养（讲） 一、基础知识 （一）培养基 【知识点讲解】 1.概念：讲解培养基概念：由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养基质。 2.种类 标准[来源:学科网ZXXK][来源:Zxxk.Com][来源:学科网ZXXK] 培养基类型[来源:Zxxk.Com] 配制特点[来源:学科网] 主要应用 固体培养基 加入琼脂较多 菌种分离、鉴定、计数 物理性质 半固体培养基 加入琼脂较少 菌种保存 液体培养基 不加入琼脂 工业生产、连续培养 3.成分 （1）基本成分 培养基成分 提供的主要营养物质 牛肉膏5g 碳源、磷酸盐和维生素 蛋白胨10g 氮源和维生素 NaCl 5g 无机盐 H2O定容至1000ml 氢元素、氮元素 （2）特殊成分和条件 培养基还需要满足不同微生物生长对PH、氧气、特殊营养物质的要求：如乳酸杆菌时需要添加维生素 ，霉菌需要将培养基pH调节为酸性 ，细菌时需要将pH调节为中性或微碱性 。 【典型例题】 有关培养基配制原则表述正确的是（ ）A. 任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水及生长因子B. 碳源和氮源必须具有一定比例，碳元素的含量最多，其次为氮元素C. 微生物的生长除受营养因素影响外，还受到pH、氧、渗透压的影响D. 营养物质的浓度越高越好【答案】C 【变式训练】 下表为某培养基的配方，下列叙述正确的是(　　) 成分 蛋白胨 葡萄糖 K2HPO4 伊红 美蓝 蒸馏水 含量 10 g 10 g 2 g 0.4 g 0.065 g 1 000 mL A.从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于选择培养基 B.该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨 C.该培养基缺少提供生长因子的物质 D.该培养基调节合适的pH后就可以接种使用 答案B （二）无菌技术 【知识点讲解】 1.主要方面 （1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行 清洁和消毒 ； （2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行 灭菌 ； （3）为避免周围微生物污染，实验操作应在 酒精灯火焰附近 旁进行； （4）避免已灭菌处理的材料用具与 周围物品相接触。 2.消毒与灭菌的比较 项目 理化因素强度 消灭微生物数量 是否消灭芽孢和孢子 消毒 温和 部分 否 灭菌 强烈 全部 是 3.常用的消毒与灭菌的方法 （1）消毒方法： ①日常生活经常用到的是煮沸消毒法； ②对一些不耐高温的液体，则使用巴氏消毒法（作简要介绍）； ③对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂 等溶液以增强消毒效果，然后使用紫外线进行物理消毒。 ④实验操作者的双手使用酒精进行消毒； ⑤饮水水源用氯气进行消毒。 （2）灭菌方法： ①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法； ②玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱 ； ③培养基、无菌水等使用 高压蒸汽灭菌法，所用器械是 高压蒸汽灭菌锅 。 ④表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。 【典型例题】 关于消毒和灭菌的不正确理解是（ ）A. 灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、包括芽孢和孢子B. 消毒和灭菌实质上是相同的C. 常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌D. 常用消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线法、化学药物法【答案】B 【变式训练】 细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌(　　) A.接种环、手、培养基 B.高压锅、手、接种环 C.培养基、手、接种环 D.接种环、手、高压锅 【答案】C 【方法点拨】灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力，对于培养基、操作器皿和接种环等都需要灭菌。消毒仅指杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害，如操作者的手和衣着需要消毒处理。高压蒸汽通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火焰灼烧可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环。学科*网 二、实验操作 （一）制备牛肉膏蛋白胨培养基 1.计算：根据配方比例，计算100mL培养基各成分用量。 2.称量：准确称取各成分。称取牛肉膏和蛋白胨时动作要迅速，目的是防止牛肉膏吸收空气中水分。 3.溶化：①加水加热熔化牛肉膏；②加入蛋白胨和氯化钠继续加热；③加入琼脂；④用蒸馏水定容到100mL。整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。 4.调pH：用1mol/LNaOH溶液调节pH至偏碱性。 5.灭菌：将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加塞包扎后用高压蒸汽灭菌锅灭菌；所用培养皿用报纸包扎后用干热灭菌箱灭菌。 6.倒平板：待培养基冷却至50℃左右时在酒精灯火焰