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专题2.1 微生物的实验室培养(预)-2017-2018学年高二生物同步精品课堂(基础版)(选修1)(解析版)
选修1专题2课题1微生物的实验室培养(预)
【预习目标】
a.了解有关培养基的基础知识。
b.了解消毒和灭菌方法。
【知识点梳理】
基础知识
(一)培养基
1.根据物理性质划分的培养基种类、用途。[来源:学科网ZXXK]
标准[来源:学。科。网] 培养基类型[来源:学科网] 配制特点[来源:Zxxk.Com] 主要应用[来源:学科网] 固体培养基 加入琼脂较多 菌种分离、鉴定、计数 物理性质 半固体培养基 加入琼脂较少 菌种保存 液体培养基 不加入琼脂 工业生产、连续培养 2.培养基的基本成分和主要来源。
营养物质 含义 主要来源 碳源 能提供碳元素的物质 无机物:CO2、NaHCO3;有机物:糖类、脂肪酸、石油、花生粉饼等 氮源 能提供氮元素的物质 无机物:N2、NH3、氨盐、硝酸盐;
有机物:尿素、牛肉膏、蛋白胨等 水 细胞生命活动必不可少的物质 培养基、大气、代谢产物 无机盐 提供除碳、氮元素以外的各种重要元素,包括某些大量元素 培养基、大气 (二)无菌技术
1.主要方面
(1)对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒
(2)将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌 ;
(3)为避免周围微生物污染,实验操作应在酒精灯火焰附近旁进行;
(4)避免已灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。
2.消毒与灭菌的比较
项目 理化因素强度 消灭微生物数量 是否消灭芽孢和孢子 消毒 温和 部分 否 灭菌 强烈 全部 是 3.常用的消毒与灭菌的方法
(1)消毒方法:
①日常生活经常用到的是煮沸消毒法;
②对一些不耐高温的液体,则使用巴氏消毒法;
③对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液以增强消毒效果,然后使用紫外线进行物理消毒。
④实验操作者的双手使用酒精进行消毒;
⑤饮水水源用氯气进行消毒。
(2)灭菌方法:
①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法;
②玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法,所用器械是干热灭菌箱 ;
③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法,所用器械是高压蒸汽灭菌锅 。
④表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法,所用器械是紫外灯。
实验操作
(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
①操作步骤→称量→溶化→灭菌→倒平板
②倒平板的方法及注意事项
a.请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程:丙→乙→甲→丁。
b.甲、乙、丙中的灭菌方法是灼烧灭菌。
c.丁中的操作需要等待平板冷却凝固才能进行。
(2)纯化大肠杆菌的方法
①纯化培养原理:想方设法在培养基上得到由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的菌落,即可获得较纯的菌种。
②纯化大肠杆菌的关键步骤是接种。
③常用的微生物接种方法有两种
a.平板划线法:是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
b.稀释涂布平板法:是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。
(3)菌种的保存方法
①对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法。
②对于需要长期保存的菌种,可以采用甘油管藏的方法。
1.有关稀释涂布平板法,叙述错误的是( )A.首先将菌液进行一系列的梯度稀释B.然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面C.D.结果都是可在培养基表面形成单个的菌落,( )
A.配制培养基时需进行髙压蒸汽灭菌
B.连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落
C.图示接种过程中接种环至少灼烧了5次
D.甲中a区域为划线的起始位置
4.如图微生物平板划线示意图,划线的顺序为1、2、3、4、5,下列操作方法正确的是( )
A.操作前要将接种环放在火焰旁灭菌B.划线操作须在火焰上进行C.在5区域中才可以得到所需菌落D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌关于消毒和灭菌的不正确理解是( )A.灭菌是指杀灭环境中的一切微生物、和孢子B.消毒和灭菌实质上是相同的C.常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌D.常用消毒方法有煮沸法、巴氏消毒法、紫外线法、化学药物法
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