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信号传导的病理生理学
The ancestral relationships among PRAK related kinases Activation of endogenous PRAK by various stimuli in vivo Effect of individual MAPK pathways on PRAK activity in intact cells Effects of SB203580 and PD98059 on endogenous PRAK activity Types of Interactions (courtesy of K. Kohn) Systems Biology: A New Paradigm Understanding from Systems Biology Platform for Systems Biology Induction of c-Jun through MEF2C phosphorylation by p38 MKK4 MKK3 MKK6 Cytokine Genes Expression LPS p38 p38 JNK JNK MEF2C c-Jun MEF2C c-Jun MEF2 site c-Jun Gene Expression TNF,IL-1,etc. Inflamatory Reaction AP1 p p p p p p p p p 5. p38在LPS诱导TNF基因表达中起着重要的调控作用 0 2 4 6 8 1 0 1 2 1 4 0 5 10 20 30 60 90 120 Time (min) Relative kinase activity Dynamic processes of p38 activation by LPS in RAW cells 0 5 1 0 1 5 Relative luciferase activity Control LPS EGF LPS+FHPI p38 is involved in the enhancement of TNF-? promoter transactivity LPS、UV刺激心肌细胞共聚焦显微镜大体扫描 LPS Control UV p38 p38? p38? p38? p38 p38? p38? p38? Red fluorescence protein（RFP）expression vector pDsRed1-N1空载体在HeLa细胞中的表达(?800) p38?RFP融合载体在HeLa细胞中的表达(?800) p38的ATP结合位点在激活后移位的作用 DTKTGLRVAVKKLSRPFQSIIHA 50 60 p38a、b、g、d ATF2 MEF2C CHOP10 SAP1 TNF-a mRNA etc. monocyte macrophage Rt LPS MKK3 / 6 MKKKs nucleus TK CD14 PRAK sHSP Cytoskeleton ? LBP ？ 本研究的病理学和临床意义: TLR4 虎杖4号 红 、肿 、热 痛、功能丧失 炎症反应 依据不同的靶点选择炎症抑制剂 MAPKs 转录因子 炎症因子 抑制炎症反应 刺激 反应B 反应A 反应C 刺激B 反应 刺激A 刺激C 细胞信号网络 细胞信号的反馈调节 + - 刺激 反应 刺激 反应 ASK1 MKK7 MKK3/6 JNK p38 Serumdepletion Transcriptionfactors,suchasc-Jun GST?expression Celldeath Celldeathrelatedgeneexpression His-TLR4 His-TLR4ic 目标基因X克隆到DNA-BD载体 随机克隆cDNAs（Y）到AD载体 基因X 共转染质粒到酵母宿主菌 在合适的培养基上选择生长的共转染菌落 进一步分析阳性克隆 基因Y 减少假阳性克隆 ?-半乳糖苷酶活性检测， 证实蛋白之间的相互作用 两个杂交蛋白在同一细胞的表达 DNA-BD/蛋白X杂交蛋白 AD/蛋白Y杂交蛋白 DNA-AD载体 DNA-BD载体 + 图7．用Two-hybridsystem筛选与TLR4相互作用蛋白的实验策略 Metabolomics Genomics Proteomics Functional Proteomics/Genomics Transcriptomics Systems Biology Southern MedicalUniversity SHOCK SIGNAL TRANSDUCTION YONG J
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