《酶工程与蛋白质工程》PPT课件第7章.pptVIP

3·末端脱氧核苷酸转移酶 末端脱氧核苷酸转移酶 (Terminal DeoxynucleotideTransferase，TDT)从小牛胸腺分离得到。 其作用是向DNA的3’-OH末端转移脱氧核苷酸。 在基因工程利用该酶给DNA片段加上一段同聚体，形成附加末端。或者用32P标记的脱氧核苷酸进行3-末端标记。 * 刘小烛科研相关应用 反转录酶：该酶又称反转录酶和依赖于RNA的DNA聚合酶。 它以RNA为模板合成DNA。 该酶在基因工程中用于从mRNA反转录生成互补DNA(cDNA)。 * Mabinlin 金属蛋白酶催化N-末端经修饰保护的L-天门冬氨酸与L-苯丙氨酸缩合生成甜味剂阿斯巴甜 (Aspar-tame)。 * 可被生物降解塑料 H O │ ‖ －【－O－C－（CH2）x－C－】n － │ R 可被生物降解塑料链烷酸聚合物的通式。 * PHB(poly-3-hydroxybutyrate, 聚3-羟基丁酸酯)，用携带有植物启动子的载体将下列基因构建为一个操纵子： 启动子－phbC－phbA －phbB ↓ ↓ ↓ PHB合酶 β-酮硫裂解酶 乙酰乙酰CoA还有酶 β-酮硫裂解酶：乙酰CoA→乙酰乙酰CoA 乙酰乙酰CoA还有酶：乙酰乙酰CoA →3-羟基丁酰CoA PHB合酶：3-羟基丁酰CoA →PHB * 思考题 胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶同属于什么酶类？作用点如何？ * * * 生物抛光是一种用纤维素酶改善纤维素纤维制品表面的整理工艺,以达到持久的抗起毛起球并增加织物的光洁度和柔软度 * 乙酰 -DL — Ala L — Ala +乙酸 乙酰 -D — Ala Aminoacylase 氨 基 酰 化 酶 * 泵 储 罐 反应产物 离心机 消旋反应器 固定化酶柱子 晶体 L-Ala L-Ala A-D-Ala A-L-Ala A-D-Ala * * 酶制剂在国外饲料工业中得到不断应用，不仅提高了饲料原料的转化率，也促进了对饲料的消化。 植酸酶Bio-Feed? Phytase ( Ronozyme? P ) 主要用于提高植酸磷的消化率，并相应改善钙和其它矿物元素的利用率。大大降低了动物粪便中磷的排放量，有益环保。 * 酶水解了毛根部的毛囊蛋白而使毛松动脱落。蛋白酶分解皮纤维间质中的可溶性蛋白质，使皮纤维进一步松散软化。 加速蛋白质的分解 染色温度降低 皮革脱毛与软化 加酶洗涤剂 生丝脱胶与羊毛染 蛋白酶 * 4 酶在环境保护中的应用 环境监测 废水处理 过氧化物酶 多酚氧化酶 可降解材料开发 * 5 酶在生物技术方面的应用 生物技术及生物工程是当代世界新技术革命的主要内容之一。在国民经济的发展中起着重要作用。 生物工程主要包括基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程和蛋白质工程。 生物工程以生物体及其代谢产物为主要研究对象。 酶是生物催化剂，在生物体及其代谢过程中是必不可少的。 * 本节内容 除去细胞壁 大分子切割 大分子连接 刘小烛科研相关实例 * 除去细胞壁 微生物和植物细胞有细胞壁。生物技术常需除去细胞壁。 (1)胞内物质的提取需将细胞壁破坏或除去。 (2)原生质体的制备。 原生质体与细胞相比有利于物质进出胞内外，在生物工程中很有应用价值。 原生质体融合使两种不同特性细胞原生质体交融结合获得具有新遗传特性的细胞。 固定化原生质体发酵使胞内产物分泌到胞外，利于氧气和营养物质的传递吸收。 在基因工程中，将受体细胞制成原生质体可提高体外重组DNA进入细胞的效率。 * 除去细胞壁的方法 不同细胞的结构和细胞壁组分不同，采用不同的酶破坏： 1·除去细菌细胞壁 对于革兰氏阳性菌采用溶菌酶可专一作用于细胞壁肽多糖分子。 对于革兰氏阴性菌需由溶菌酶和EDTA共同作用才能达到较好的除去细胞壁的效果。EDTA可作用于脂多糖。 * 2·除去酵母细胞壁 酵母细胞壁有两层，外层由磷酸甘露糖和蛋白质组成，内层由β－1，3－葡聚糖构成骨架。采用β－1，3－葡聚糖酶使β－1，3－葡聚糖水解。 β－1，3－葡聚糖酶与磷酸甘露糖酶及蛋白酶联合作用，使细胞壁的内外两层同时被破坏，显著提高破壁效果。 * 3，除去霉菌细胞壁 不同种属的霉菌，其细胞壁结构和组分差别较大： 藻菌纲霉菌的细胞壁主要由几丁质 和壳多糖等组成。用产生于放线菌或细菌的细胞壁溶解酶（含壳多糖酶、几丁质酶