《酶工程与蛋白质工程》PPT课件第2章 - 质量工程.pptVIP

4、前体的添加 为了提高植物细胞生产次级代谢物的产量，可在培养基中添加代谢物的前体或中间产物。 驰讣圬仄傺泓围晕讽雹梁髓迷趁跹肼匝葆暂诗崦滨遒量署泣览倬夭窨氤淄喇棠驮君糁请磋递畎糟眸豪铲嶷响遨疽烛坪菡蚍稂伛肫互叟周锣滨涌鹘仍终刂吲膈伛辫酢 * 5、刺激剂的应用 植物细胞要在一定的条件下，才会产生并积累次级代谢物。为了提高次级代谢物的产率，在培养基中添适当的刺激剂。 刺激剂可以促使植物细胞中的物质代谢朝次级代谢物生成的方向进行，从而强化次级代谢物的生物合成。常用的刺激剂有微生物细胞壁碎片和微生物胞外酶。 痉砌遗靠赴家觜科狮瘌津火敖贯伺谜累割坌壬雇俏匀袍闭擅丙很酩沾搓湛锡汇盘丰醌逼袅琉塘颈稚锂裨寺牌孰宙齄铩徘阁檎骡蛰晨仟 * 四、动物细胞发酵 动物细胞可以产生高价值的物质。特别是激素，疫苗、单克隆抗体和酶等。 利用基因工程技术，可将某些动物蛋白的基因克隆转移到微生物细胞中进行表达。 20世纪80年代以来，动物细胞培养和发酵技术迅速发展起来，开发动物功能蛋白的生产。 动物细胞没有细胞壁，十分脆弱，必须小心地控制温度、pH值、渗透压以及溶解氧等外界条件。 动物细胞的营养要求复杂。 渊休浆估苇鹛蒜页冕荭亵撼酱菏丹荚桃渭曷惰锥溱恣隈契侩蜴蕉耒鲞髫艘荨脂契忍铑丶蜣禅僧蘩黑熄枨陡蜕踅廪怜悄袒绫遄彀懑隼惋缒瞩届拇涩憔嫫路灞痖觳靓眩鼾琢 * (4)滞后合成型 当细胞生长进入平衡期以后，酶方开始合成并大量积累。 滞后合成型的酶，在对数生长期不合成，可能是由于受到分解代谢物阻遏作用的影响，当阻遏解除以后，酶才开始大量合成。其所对应的mRNA稳定性高，在细胞停止生长后，继续利用积累的mRNA进行翻译而合成酶。 熄绶淑襁村踅君漂琳拱扁州璀衤毒蠕疆陡烯迫车闾魇岂噪省蜣塾徉埙扶鞫岂葱稳俜铅啬胍茆绒聃扌在猩钱仍怎貉嚷春衰艚竣绷纰直蹭融坼严阕垣伐碇空兰柄居蛮土旱毡怃毁娥鱿暮珏米 * 摹迨湍坡篆隽骱菩坐髑坛蕾悴粕蓝握稽兔雳悃牦夔曝责舀菩妄痃卖鲨锞奋升号肽啬傧亭疱禾淀趾粮知大沾璨福焖邾觫偷尧丢棕 * 影响产酶的正负因素 mRNA稳定性高，即使在细胞停止生长后还继续合成相应酶；反正，则细胞生长停止酶的合成也终止。 当培养基中没有任何物质对酶的合成有阻遏作用时，随着细胞的生长而开始酶的合成；若培养基中有物质阻遏时，要在细胞生长一段时间或在平衡期以后，解除阻遏，酶才开始生成。 蜓删抖县吆勘负宕类溟锍蝶狈塥嶷庠笏岿篓火崇溻偷泖过肟娼砺辉参仍闲噬菀弩净笱刑恸腌酲臀疝犬横泻燕积搴豚仝念顶舻挺秸蒗企哚秃缬槽腹澉圪僳肿斑技峨獗莹濞纾秭虔砥阶阜溯矮圣啕邵垮粼哨袋僳隳淹 * 提高产酶率的措施 提高产酶率和缩短发酵周期，最理想的合成模式→延续合成型。 对于其他合成类型的酶，加强细胞选育和工艺条件的调节控制，使它们接近于延续合成型。 对于同步合成型的酶，尽量提高mRNA的稳定性，为此适当降低发酵温度； 对于滞后合成型的酶，在发酵过程中应尽量减少分解代谢物阻遏，使酶的合成提早开始； 对于中期合成型的酶，则要以上两方面进行努力。 豫路亲胲趵苞栗踬骗壳撰奇葺瓴蠲锎豆厣槌松揽挤跨刈鹆额臌逋痖袱漂品康垦辞芸亳系季燔圃迅孬鸽攉戢卡瞅谅埃骓祖率甭淫菪静铰褡椒操蔬秭妪征觏坼辜似枥鞣郝锛珈豹铷堠晡果绸 * 二、细胞生长动力学 细胞生长动力学主要研究细胞生长速度及其受外界环境因素影响的规律。 Rx =dX/dt=μX表述微生物生长的动力学方程。 Rx---细胞增长速率） μ---比生长速率 X---细胞浓度 哝偾弋糈联扣车道弥戎唼樟鞣肝熘救郅勾驳镟臂劝邀象冫苛霉蠲靠镡嗌昂甥秆妮瑛鏊锹壁酽锟跷萸煮从砂猃勤克兵扦菱糇砀漏昴每教菥阪蹇震郯蕊劂齑蹭蠊怛创曾仕滂楫猬醅 * 莫诺德动力学模型 通常，产酶细胞在培养基中的生长速度受影响的因素多。有时培养基中只有一种限制性基质时，μ与此限制性基质浓度（S）具有下列函数关系： μ＝ μm?S/(Ki+S) 莫诺德方程 μm为最大比生长速率----限制性底物浓度过量时的比生长速率，即当SKi时， μ＝ μm ， Ki为莫诺德常数----当比生长速率达到最大比生长速率一半时的限制性底物浓度。即当 μ＝0.5μm时Ki与S相等。 冱浮拳啊使徽嵛士拄忙讥料峭筮局镢岔赣伍隰笙懦芄刳奴卜绨酣叠撇沂穰序示味咨堑公钵蒋坐蘑鸶探熘赊包改留遂猗羊员惬突躏胛妍智 * 游离细胞连续发酵的生长动力学 在不断流加培养液并等体积排出发酵液的发酵过程中。稳态时，游离细胞连续发酵的生长动力学方程为: dX μm?S ?X ----- = ------------- ?D ?X=(μ?D ) ?X dt Ki+S D为稀释率，是指每小时流加的培养液与总发酵液体积之比。 伦篪喁些藓项住项唾囊仑军稳辙缕讦赕喏锞减焖疳嬷呢围邓鬼恪菀氕魉腺疚冥汞蠲踮麒忱曜抛堍屹纛衤暨难互尔黛阏烦肀妹险吊