微生物青贮接种剂研究进展文档.doc

微生物青贮接种剂研究进展 河南农业大学 付彤 中国农业科学院饲料研究所 刁其玉摘　要　本文综述了微生物青贮接种剂对青贮发酵、青贮质量及动物生产性能的影响，及微生物青贮接种剂使用方法，并展望了微生物青贮接种剂的研究方向。　　关键词　青贮饲料　微生物接种剂 　　青贮接种剂是微生物青贮接种剂（Silage Microbial Inoculants）的简称，也叫青贮接种菌（Silage Bacteria Inoculants）。人们对青贮接种剂（接种菌）的早期定义是：一种额外提供给乳酸菌以保证快速而良好青贮发酵的添加剂。青贮接种剂中应用最普遍的乳酸菌是植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum），接种剂中的乳酸菌通常是从作物或青贮料中筛选出来的，之所以被选择是因为其繁殖迅速，并且是同型发酵。但是随着生产和研究的发展，接种剂不再是单一的同型发酵乳酸菌制剂，一些异型发酵乳酸菌、丙酸菌甚至乙酸菌都成了接种剂的组成成分，它们或单独使用，或联合应用，有时还与某些酶制剂复合在一起。目前美国市场有200多种青贮添加剂，其中主要是接种剂（林春健，2003）。　　1　青贮接种剂的种类　　目前研究和应用的青贮接种剂按使用目的可以分为两类，一类是促进发酵的微生物，主要包括同型发酵乳酸菌；另一类是提高青贮饲料有氧稳定性的微生物，主要包括布氏乳杆菌和丙酸菌，但这些种类又往往会复合在一起，且很多商品制剂种还加入了纤维素酶、半纤维素酶等酶制剂，以增加接种菌的发酵底物，因此，对于商品制剂来说，往往很难分类。　　同型发酵乳酸菌接种剂是一种传统的接种剂，经常使用的是具有同型发酵能力的如植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）、粪链球菌（Enterococcus faecium）和片球菌（Pediococcus spp）等，它们可以有效的利用作物的可溶性碳水化合物，增加乳酸的产量、迅速的降低pH值（Weinberg和Muck1996）。当然，很多接种剂含有一种以上的乳酸菌或含有同一类的几种乳酸菌，因为不同的乳酸菌可以在不同的pH条件下生长良好，这样可以使青贮的不同阶段（pH4～6）都有快速的发酵，多种乳酸菌也可使接种剂对于各种作物、水分和温度均有良好的表现。　　Whittenbury1961年首先提出了理想接种标准（Seale，1986年），这一原始标准不断的被完善（McDonald，1991；Seale，1986；Woolford和Sawczyc，1984；Hellings等，1985），可将其主要内容可归纳为：①快速生长并同自然菌株的成功竞争；②糖的同型发酵和乳酸的快速产生；③耐酸性（pH接近4）；④发酵范围较广的糖类；⑤不产生源自蔗糖的不可发酵的右旋糖苷和源自果糖的甘露醇；⑥不降解有机酸；⑦温度在50℃以上时可以增殖或者至少可以生存；⑧低湿度的萎蔫牧草上增殖较好；⑨最好是单产L（+）乳酸异构体的菌株。　　布氏乳杆菌具有提高青贮饲料有氧稳定性能力，如Lactobacillus buchneri 40788，一种异型发酵乳酸菌，它可以产生高剂量的乙酸抑制酵母和霉菌，从而使青贮饲料在暴露于空气中时不易损坏（Driehuis等1999；Weinberg等2002）。布氏乳杆菌是近十年来才被人们认识的，它的应用改变了接种剂原有的定义和标准。此外，还有一些接种剂含有丙酸菌，目的和使用布氏乳杆菌相似，即利用其生产丙酸的能力来提高青贮饲料的有氧稳定性。　　2　青贮接种剂对发酵的影响　　接种剂对青贮的主要影响是增加发酵速率和发酵产物的转换，如果接种的同型发酵乳酸菌支配了发酵，它们的快速增殖会引起pH迅速下降及乳酸与乙酸和乙醇的比例增加，由于乳酸的酸性高于乙酸，pH下降的更快，成功的接种剂会造成低的终pH。这可能归咎于两个原因：接种剂中典型的乳酸菌可以在较低的pH下生长，以便在其被抑制之前持续发酵造成更低的pH值；即使受到糖的限制，由于从乙酸向乳酸的发酵转换仍可以使pH更低。　　蔡义民等（1995）在意大利黑麦草添加乳酸菌有效地抑制了与青贮饲料共存的丝状菌（霉菌）、酵母菌及一般细菌的繁殖，乳酸杆菌制菌效果大于乳酸球菌。此外，添加乳酸菌使pH及氨态氮与全氮比值（NH3-N/TN）降低，乳酸含量提高，改善了青贮饲料发酵品质。还增加了L（+）乳酸的生成比率。傅彤（2005）报道了添加植物乳杆菌和乳酸片球菌，降低了全株玉米青贮的pH值，提高了乳酸、总有机酸生成量及乳乙酸比例，减少了乙酸生成量。Muck和Kung（1997）对从1990～1995年期间发表的使用青贮接种剂的试验结果进行总结时发现：接种菌可以有效降低pH，并使发酵时乳酸含量升高的试验超过60％；接种菌的效果依不同的青贮原料而定，禾本科牧草、紫花苜蓿和三叶草效果最为明显（59％