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Page ? * Page ? * 超临界流体萃取微生物发酵产物及海洋生物活性物质 微生物与生化药学 齐林 201130284 王波涛 201130266 目录 一.应用超临界CO2从乳酸杆菌中萃取糖脂 二.应用超临界CO2从酵母菌中提取角鲨烯 三.通过超临界流体和有机溶剂从依靠油脂生长的细菌细胞中提取纯净的中等链长度聚羟基脂肪酸酯 四.预处理对超临界流体提取酵母细胞中的脂类物质的影响 五.不同超临界流体萃取乙醇时对微生物新陈代谢的影响 六.超临界流体萃取技术在海洋生物活性物质提取中的应用 一.应用超临界CO2从乳酸杆菌中萃取糖脂 乳酸杆菌是一种革兰氏阳性菌,它存在于环境中的各个角落,包括人类的胃肠道内。它在食品工业中有着重要的作用,同时,它也是一种重要的益生菌,对人体的健康十分有利。 糖脂是这类益生菌的重要成分,它可以被用作疫苗或者其他制剂产品 超临界CO2萃取糖脂的实验参数通过一种两步分级设计实验得到最优化。 糖脂最大产率的实验条件是: 压力25Mpa 温度40℃, CO2流量10g/min 传统的有机溶剂萃取法已经应用于糖脂的提取,但是它有很多的缺陷: 萃取时间长 目标物产率低 产生大量有毒的有机溶剂废液 对环境影响大 相对传统的有机溶剂萃取,超临界流体萃取是一种现代化有前景的提取方式: 萃取时间短超临界流体具有低粘度,高扩散性的特点使得它很容易穿透物质,获得较高的传质效率 产物于溶剂易分离物质在超临界CO2中的溶解度随温度和压力的变化比较大 ASFE-2X100FBPR 自动背压调节阀CS旋风分离器 在不同温度和压力下角鲨烯的得率 根据上面那个表格,可以得到提取角鲨烯的最佳工艺参数: 温度 60℃ 压力 25 ~ 25.5Mpa CO2流量0.2 L/min 三.通过超临界流体和有机溶剂从依靠油脂生长的细菌细胞中提取纯净的中等链长度聚羟基脂肪酸酯 聚羟基脂肪酸酯(PHA)是一种多聚β酯。是多种细菌的碳源和能源储备物质,在发酵的过程中,PHA可以累积的到一个很高的量。 根据C原子数的多少,PHA可以被分为短链和中等长链,C原子数在6-14个的PHA是我们需要的。 PHA是一种很好的热塑性材料,而且具有生物可降解的性质。目前PHA的应用范围正在不断的扩展,它的市场需求也在不断增加,这就需要我们增大PHA的产量,并且降低生产成本。 生产PHA的成本主要来自三个方面: ⑴发酵培养基(主要是动物油脂像猪油,牛油) ⑵分离发酵产物 ⑶处理发酵和分离后的废液 传统的从依靠油脂生长的细菌细胞中提取PHA的方法费时费力,因为PHA和其他脂类培养基在氯仿中的溶解度极其相似,所以,需要一种耗时短,有机溶剂使用少,获得产物较纯净的新型方法来取代原来的方法。 超临界流体萃取经常应用在从其他材料中提取脂类,但是很少有关于超临界流体在细菌细胞材料中的应用的报道。 这项研究的目的就是看看超临界流体萃取能不能够应用于从大量来自牛油和羊油的发酵液中的菌体中除去脂类杂质。从发酵产物中得到更有效更纯净的产物PHA 本实验采用两步处理法来分离纯化PHA 第一步为超临界CO2除去脂类杂质 第二步为氯仿从细胞中获得PHA 萃取过程的实验参数: 温度:40-100℃ 压力:2000-9000psi(psi—磅/平方英尺,1psi=6.895Kpa=0.06895bar) CO2流速:0.5-1.5L/min 为了避免萃取初期大量的脂类物质堵塞气流限制装置,本实验采取程序升压的方式,下图为在每一小时升高1000psi,将压力从2000psi升高到7000psi,升压是CO2的流量为0.5L/min 在压力2000psi,萃取量很少,压力升高到3000psi时也是只得到少量物质。当压力为4000psi时,才萃取得到大量脂类物质。 从图上还可以看出,低温的时候萃取效果更好,40℃时4小时就能达到60℃时5小时的萃取量。所以,选择较低温度,既能节约萃取时间,同时也能节省CO2的使用量。 四.预处理对超临界流体提取酵母细胞中的脂类物质的影响 微生物被认为是除植物和动物以外脂类物质的一个重大来源,酵母细胞最大可以积累自身重量20%的脂类,包括大量的甘油三酯以及少量的磷脂。 应用不同的有机溶剂,如氯仿,甲醇,乙烷,石油醚等提取酵母菌中的脂质已经应用于工业中。但是,这些有机溶剂需要被一种无毒的,不易燃,更加温和的溶剂取代 CO2是一种化学惰性,廉价易得,环境友好的气体,超临界CO2技术被认为是一种绿色可持续的技术。物质在超临界CO2的溶解度和超临界流体的选择性可以通过操作条件和容易的控制。所以应用超临界CO2提取酵母菌
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