丹参药效学实验离体蛙心实验课件幻灯片.pptVIP

丹参的药效学实验 实验组号：第 --- 组 实验组员 ：------------------ 河南中医学院2010级研究生一班中药药理实验 实验内容介绍 实验立题 实验目的 实验原理 实验材料 实验方法 实验过程 实验结果记录 失败原因分析与讨论 注意事项 实验立题(丹参简介） 出处：《神农本草经》。 来源：本品为双子叶植物唇形科 丹参的干燥根及根茎。 性苦，味微寒。归心、肝经。 功效：活血调经，祛瘀止痛，凉血消痈，清心除烦，养血安神。 药理研究 ① 强心 ② 扩张血管 ③ 抗血栓形成④ 改善微循环 促进组织的修复与再生作用 保肝 抗菌 降血脂 实验立题（实验题目） 丹参强心的药效学实验 丹参离体蛙心实验 实验目的 观察丹参对离体心脏心率及心肌收缩力的影响，探索丹参的强心作用。 掌握离体心脏的制备方法。 掌握药理科研实验设计的一般思路与方法。 实验原理 心肌具有自动节律性收缩的特性，可用人工灌流的方法，研究心脏活动的规律及特点；还可观察灌流液成分的改变对离体心脏活动的影响。 丹参具有强心作用。 心肌细胞内Ca2＋含量增高，使心肌收缩能力增强，故在实验中，可用低钙任氏液灌注蛙心，使心脏的收缩减弱，可以提高心肌对丹参的敏感性。 。 实验材料 仪器：蛙板、探针、剪刀、小镊子、双凹夹、长柄木夹、丝线、斯氏蛙心套管、记录装置 （BL-420电脑记录仪及肌张力转能器)、 蛙心夹、铁支架、 lml 注射器、铁架台（包括附属夹子2个） 、50烧杯2个。 药品：任氏液、低钙任氏液（所含CaCl2量为一般任氏液的1/3，其它成分不变 ）、丹参注射液。 动物 ：牛蛙2只 实验方法 打开电脑，连接BL-420系统 制备心脏离体 测定 实验方法 备 打开电脑BL-420系统 选择相应信号通道 选择张力实验 调节生物信号 编辑实验相关信息（实验题目，等） 开始实验 信号曲线保存（另存） 打印 连接BL-410系统 停止实验 打印 取牛蛙1只，用探针破坏脑及脊髓，背位固定于蛙板上。 剪开胸部皮肤，再剪除胸部肌肉及胸骨，打开胸腔，剪破心包膜，暴露心脏。 在主动脉分支处下穿一线，打好松结，备结扎套管用。于左主动脉上剪一“ V ”形小口，插入盛有任氏液的蛙心套管，通过主动脉球转向左后方，同时用镊子轻提动脉球，向插管移动的反方向拉，使套管尖端进入心室。见套管内的液面随着心搏上下波动后，将松结扎紧并固定在套管的小钩上。用滴管吸去套管内血液，防止血块堵塞套管。 结扎右侧主动脉，剪断主动脉，持套管提起心脏，自静脉窦以下把其余血管一起结扎（切勿伤及或结扎静脉窦），分离周围组织，在结扎处下剪断血管，使心脏离体。并用任氏液连续换洗，至无血色，使插管内保留1.5ml左右的任氏液。 将蛙心套管固定于铁架台，用带有长线的蛙心夹在心舒期夹住心尖部，将长线连于张力换能器。 制备离体心脏 正常曲线测定：向导管内加入1.5ml任氏液，待心脏曲线稳定后，标记（曲线位置），记录一段正常心脏搏动曲线。 低钙任氏液曲线测定：将导管内任氏液吸出，加入1.5ml低钙任氏，液待心脏曲线稳定后，标记，记录一段心脏搏动曲线。 丹参注射液曲线测定：当心脏收缩显著减弱时，向导管内加入丹参注射液，体积依次为：0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml. ※：每次加药业前应将上次所加药液吸出，加入药液后，液体总体积应相同（1.5ml）. 测量 实验过程 第一次实验：离体心脏制备时，由于分离心包膜时，将静脉窦下面的静脉血管剪断，没有结扎，再加上结扎不严实，漏液严重；在加丹参注射液时，由于剂量过大，心脏停止跳动。 第二次实验：离体心脏制备时，结果与第一次一样（静脉窦下面的静脉血管不易辨认）--将静脉窦下面的漏液处用丝线结扎，其他漏液处亦重新结扎，几乎不再漏液；在加药液过程中，加低钙任氏液之前一直正常，但低钙液加入一段时间后，曲线剧变，后加丹参液，心脏停止跳动。 实验结果记录及分析(一） 实验结果记录及分析(二） 加入低钙任氏液一段时间后（加丹参前），曲线剧变图 结果分析 ①第一只牛蛙心脏：由于漏液严重，及加药液过多，心脏停止跳动，实验失败。 ②第二只牛蛙心脏：在加入低钙任氏液一段时间后，（不正常原因）曲线剧烈变化，在当加入药液后停止跳动，实验失败。 实验失败原因分析与讨论 原因分析： ① 加药量过大，导致心脏死亡（？为什么一加药液，曲线立即变为近似一条直线？） ② 外界气温较低，心脏暴露空气中时间太长。 ③ 在静脉血管