第八章 蒽醌的提取分离.ppt

提取原理： 根据大黄中的羟基蒽酮苷经酸水解成游离蒽醌苷元，苷元可溶于氯仿而被提出。再利用各蒽醌类化合物酸性不同，采用pH梯度萃取法进行分离而得到各单体苷元。 大黄粗粉 苯及20%硫酸连续回流提取2~3次 苯液 5%NaHCO3萃取 NaHCO3液 HCl酸化 沉淀 重结晶 大黄酸（黄色针晶） Na2CO3液 HCl酸化 沉淀 重结晶 大黄素（橙黄针晶） 苯液 5%Na2CO3萃取 苯液 0.5%NaOH萃取 NaOH液 苯液 酸化 沉淀 重结晶 芦荟大黄素（橙黄针晶） 回收苯 残留物 大黄酚（金黄色针晶） 大黄素甲醚（砖红色针晶） 硅胶柱色谱 石油醚-苯洗脱 决明子中蒽醌类化合物的提取 决明子有清肝，明目，通便的作用。用于头痛眩晕，目赤昏花，大便秘结。治风热赤眼，青盲，雀目，高血压，肝炎，肝硬化腹水，习惯性便秘。 其蒽醌衍生物主要以苷形式存在，也含有一些游离的羟基蒽醌衍生物。 决明子蒽醌可用柱色谱予以分离。 方法：决明子用氯仿，20％H2SO4提取3次。合并氯仿提取液，浓缩，然后拌在少量磷酸氢钙上，把它加在预先装好的磷酸氢钙（干法装柱）柱上。用苯洗脱，先在柱上出现5个色带，继续用苯洗脱，分别收集各色带的洗脱液，各色带的洗脱液分别按下述方法处理。 （1）第一条色带，蒸干苯后所得的黄色物质，用石油醚萃取，再以磷酸氢钙干柱分离，以石油醚洗脱，又可分得两部分。先洗出者为大黄酚，后洗出者为大黄素-6-甲醚。 （2）第二条色带，蒸干苯后得针状结晶，以甲醇重结晶，得钝叶素。 （3）第三条黄褐色带，蒸干苯后得长针状结晶，以乙醇重结晶，得决明素。 （4）第四条黄色带，蒸干苯后得针状结晶，以甲醇重结晶，得甲基钝叶决明素。 （5）第五条橙黄色带，蒸干苯后得针状结晶，以乙醇或氯仿重结晶，得决明素。 故蒽醌类成分的酸性按强弱顺序大致排列为： 含-COOH＞含2个以上β-OH＞含1个β- OH＞含2个以上α-OH＞1个α-OH 根据蒽醌类化合物的酸性强弱的不同，可用梯度pH萃取法来分离。 酚羟（羧）基种类 碱溶液 -COOH或2个以上β-OH 5%NaHCO3 1个β-OH 5%Na2CO3 2个或多个α-OH 1%NaOH 1个α-OH 5%NaOH 酸性 碱性 4.酸碱性——碱性 由于氧原子的存在，蒽醌类成分也具有微弱的碱性，表现为能溶于浓硫酸中成盐再转成阳碳离子，同时伴有颜色的显著改变，一般显红至紫红色。 大黄酚：暗黄色 红色 大黄素：橙红色 红色 浓H2SO4 浓H2SO4 5.蒽醌类化合物的检识反应 （1）显色反应 ①碱显色反应：羟基蒽醌衍生物遇碱显红色或红紫色等，颜色与分子中羟基所在位置有关。是检识中药中羟基蒽醌成分存在的最常用方法之一，对羟基蒽醌结构的判定有辅助作用。 试剂：碱性溶液（氢氧化钠、碳酸钠、氢氧化铵）。 作用基团：羟基蒽醌衍生物（有游离羟基者）。 现象：羟基蒽酚、蒽酮、二蒽酮类化合物遇碱呈黄色且带绿色荧光，需在空气中或经3％H2O2氧化成蒽醌后，才显示上述颜色。　　 羟基蒽醌的Borntr?ger反应 蒽醌化合物 颜色 蒽醌化合物 颜色 1-OH 红 1,8-二OH 红 2-OH 橙-红 1,2,3-三OH 绿 1,2-二OH 紫-蓝 1,2,4-三OH 紫-红 1,3-二OH 红 1,4,5-三OH 紫 1,4-二OH 紫 1,4,5,8-四OH 蓝 1,5-二OH 红 反应机理： ②醋酸镁显色反应 羟基蒽醌和0.5%醋酸镁甲醇或乙醇溶液生成稳定的橙红色、紫红色或紫色的络合物，反应灵敏，可作色谱显色用。 试剂：0.5％乙酸镁的甲醇或乙醇溶液。 作用基团：羟基蒽醌（有α-OH或邻位二OH）。 反应现象： 游离蒽醌化合物 颜色 1个α-OH或1个β-OH，或二个OH不在同环时 橙黄~橙色 已有1个α-OH，并且在间位有另一个-OH 橙红~红色 已有1个α-OH，并且在邻位有另一个-OH 蓝~蓝紫色 已有1个α-OH，并且在对位有另一个-OH 紫红~紫色 邻位二β-OH 蓝色 反应机理： 蒽醌镁络合物（橙色） ③对亚硝基二甲苯胺反应 9、10位上未取代的羟基蒽酮类化合物，酮基对位亚甲基上的H很活泼，可与0.1%对亚硝基-二甲苯胺吡啶溶液反应缩合而产生各种颜色。 试剂：0.1％对亚硝基二甲苯胺吡啶溶液。 作用基团：9位或10位未被取代的羟基蒽酮类化合物。 反应现象：随分子结构而不同，如1,8-二羟基者具绿色。 用途：蒽酮化合物的定性检查。 反应机理： （2）色谱检识 方法：硅胶薄层检识、聚酰胺薄层检识 展开剂：混合溶剂 游离蒽醌——亲脂性溶剂系统