人教版高中生物选修3第二章基因工程的基本操作程序（课件 共28张PPT).ppt

1.2 基因工程的基本操作程序（第二课时） 导入胰岛素基因的大肠杆菌 教学目标 1、说出基因工程原理及基本操作 2、程序分析基因工程四个步骤的原理、工具及具体操作过程（重点）。 3、尝试设计某一转基因生物的研制过程、（难点） 。 目的基因的获取 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定 知识回顾：基因工程基本操作的四个步骤 什么是目的基因？获取目的基因的方法有哪些？ 表达载体的组成有哪些？ 常用方法有哪些？常见的受体细胞有哪些？（请阅读P11-13教材内容） 检测的步骤与方法有哪些？（请阅读P13-14教材内容） 复习提问1：一、目的基因的获取 1、目的基因主要是__________________ 编码蛋白质的结构基因 2、获取目的基因的常用方法有哪些? 1、从基因文库中获取 2、利用PCR技术扩增 3、人工合成 二、基因表达载体的组成： 目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可 以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用。 a、目的基因 b、启动子 c、终止子 d、标记基因 新课学习： 【自主学习1】 三、将目的基因导入受体细胞 1、 目的基因导入受体细胞常用方法有哪些？ 2、 常见的受体细胞有哪些？ 3、导入受体的原理依据什么？ （请阅读P11-13教材内容） 【归纳】将目的基因导入受体细胞 （一）转化： （二）方法 将目的基因导入 植物细胞 将目的基因导入 动物细胞 将目的基因导入 微生物细胞 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 ——显微注射法 ——感受态细胞 目的基因进入_________内，并且在 受体细胞内维持_____和_____的过程 受体细胞 稳定 表达 要点精讲：1、将目的基因导入植物细胞 （1）农杆菌转化法 （2）基因枪法 （3）花粉管通道法 2、将目的基因导入动物细胞 ①方法：显微注射法 ②程序： 目的基因表达载体提纯 取卵（受精卵） 显微注射 受精卵 新性状动物 3、将目的基因导入微生物细胞 ①原核生物特点：繁殖快、单细胞、遗传物质少 ②方法： 用Ca2+处理细胞 感受态细胞 表 达载体与感受态细胞混合 感受态细胞吸收DNA分子。 受体生物 植物 动物 微生物 受体细胞 导入方法 体细胞、受精卵 受精卵 细胞/个体 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 显微注 射技术 用Ca2+处理成感受态细胞 课堂练习：采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的作法正确的是（　　）A.将毒素蛋白注射到受精卵中B.将编码毒素蛋白的DNA序列，与质粒重组，导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养C.将编码毒素蛋白的DNA序列，与质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵D.将编码毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵中 【自主学习2】 四、目的基因的检测与鉴定 ——检查是否成功 问题：检测的步骤与方法有哪些？ （请阅读P13-14教材内容） （一）、检测 1、检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因 (关键步骤) ①.首先取出转基因生物的基因组DNA ②.用含目的基因的DNA片段用放射性同位素等作标记,以此做探针 ③.使探针和转基因生物的基因组杂交,若显示出杂交带,表明染色体已插入染色体DNA中 （1）方法: DNA分子杂交 （2）过程: 15N 15N 14N 14N 探针 转基因生 物的DNA 变性 变性 分析课本12页图 DNA分子杂交示意图 采用一定的技术手段，将两种生物的DNA分子的单链放在一起，如果这两个单链具有互补的碱基序列，那么，互补的碱基序列就会结合在一起，形成杂合双链区；在没有互补碱基序列的部位，仍然是两条游离的单链。 【思考与探究】 P15 （二）、鉴定（个体生物学水平） 2、检测目的基因是否转录出了mRNA 3、检测目的基因是否翻译成蛋白质 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 ①方法: 分 子 杂 交 方法: 抗原抗体杂交 ②过程: 用上述探针和转基因生物的mRNA杂交,若出现杂交带,表明目的基因转录出了mRNA 【归纳】目的基因的检测与鉴定小结 ——检查是否成功 检测— 鉴定—— ①检测转基因生物染色体的DNA 上是否插入了目的基因(关键) ②检测目的基因是否转录出了mRNA ③检测目的基因是否翻译成蛋白质 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 方法—— 方法—— 方法—— DNA分子杂交 分子杂交 抗原抗体杂交 【课堂练习】