蛋白质与氨基酸.课件幻灯片.ppt

近年来由于DNA序列的测定发展很快，可将相应于蛋白质的DNA序列测定出来后，推出蛋白质的序列，为蛋白质一级结构的测定带来了新的曙光。 一级结构测定展望 5．蛋白质序列数据库 (1) PIR（Protein Information Resource）数据库 (2) SWISS-PROT数据库 （2）固相合成法 （3）酶促合成法 固相合成的优缺点 四、蛋白质的分类 （一）根据蛋白质分子的形状 1．球状蛋白质（globular protein） 2．纤维状蛋白质（fibrous protein） （二）根据组成和溶解度 1．单纯蛋白质（simple protein）: 也称简单蛋白质，完全由氨基酸组 成的蛋白质。 单纯蛋白质的分类（根据溶解度的不同） (1) 清蛋白（albumin）：溶于水及稀盐、稀酸或稀碱溶液。如血清清 蛋白。 (2) 球蛋白（globulin）：不溶于水而溶于稀盐溶液，如血清球蛋白。 (3) 谷蛋白（glutelin）：不溶于水、醇及中性盐溶液，但溶于稀酸、 稀碱，如米谷蛋白。 (4) 谷醇溶蛋白（prolamine）：不溶于水，但溶于70%～80%乙醇， 如玉米醇溶蛋白。 (5) 组蛋白（histone）：溶于水及稀酸溶液，分子中含Arg、Lys 较多，呈（弱）碱性，如小牛胸腺组蛋白。 (6) 鱼精蛋白（protamine）：溶于水及稀酸溶液，分子中含碱性 氨基酸特别多，呈（强）碱性，如鲑精蛋白。 (7) 硬蛋白（scleroprotein）：不溶于水、盐、稀酸、稀碱溶液。 如胶原蛋白、角蛋白、丝心蛋白、弹性蛋白等。 2．缀合蛋白质（conjugated protein）：也称结合蛋白质， 由蛋白质和非蛋白质两部分组成。 缀合蛋白质的分类（根据非蛋白质即辅基的不同） (1) 糖蛋白（glycoprotein）：含糖类，如胶原蛋白。 (2) 脂蛋白（lipoprotein）：含脂类，如血浆脂蛋白。 (3) 核蛋白（nucleoprotein）：含核酸，如核糖体。 (4) 磷蛋白（phosphoprotein）：含磷酸，如酪蛋白。 (5) 金属蛋白（metalloprotein）：含金属，如铁蛋白含Fe。 (6) 血红素蛋白（hemoprotein）：辅基为血红素，如血红蛋白。 (7) 黄素蛋白（flavoprotein）：辅基为黄素（FAD或FMN）， 如琥珀酸脱氢酶（含FAD）。 （三）根据功能 1.活性蛋白质（active protein） 包括生命活动过程中一切有活性的蛋白质以及它们的前体分子，绝大多数蛋白质属于活性蛋白质，包括酶、激素蛋白、运输蛋白（转运蛋白）、贮存蛋白、运动蛋白、保护或防御蛋白、受体蛋白、控制生长和分化蛋白、毒蛋白、膜蛋白等。 2.非活性蛋白质（passive protein） 对生物体起支持和保护作用，主要指硬蛋白包括胶原蛋白、角蛋白、丝蛋白、弹性蛋白等。 五、蛋白质的结构 当多肽的分子量大到足够具有一定的空间结构时就称为蛋白质。 蛋白质与多肽的主要差别：分子量，空间结构 为了对蛋白质结构叙述的方便，人为地将蛋白质的结构分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结构。 蛋白质的一级结构又称初级结构，二级结构、三级结构、四级结构的三度空间排列称蛋白质的空间结构、高级结构、三维结构或构象。 随着蛋白质化学研究的进展，越来越多的人认为在二级结构和三级结构之间应加入超二级结构和结构域这两个层次，所以蛋白质的结构层次为： 一级结构 二级结构 超二级结构 结构域 三级结构 四级结构 （一）蛋白质的一级结构（primary structure） 1．定义： 蛋白质的一级结构是指蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序（sequence），一级结构的主要连接键是肽键。 2．蛋白质一级结构的测定 概况 : 序列测定前的准备工作： 样品的纯度 相对分子质量 肽链的数目 氨基酸组成 一级结构的测定主要用小片段重叠的原理 序列测定方法 （1）末端分析：包括N端分析，C端分析 N端分析方法 ① 二硝基氟苯法（DNP法、DNFB法或FDNB法） ② 丹磺酰氯法（DNS法） ③ 苯异硫氰酸(酯)法（PITC法、PTC法、PTH法、Edman降解法 ） ④ 氨肽酶（aminopeptidase, Apase）法 Ala Val Gly 亮氨酸氨肽酶（Leucine amino peptidase, LAP） 专一性: A=非极性氨基酸时 快 A=其它氨基酸时 慢 A