原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
分子生物学试验一试验一苏力菌质体DNA抽取与洋菜胶电泳分析
分子生物學實驗( 一)
實驗一
蘇力菌質體 DNA抽取與
洋菜膠電泳分析
1
實驗背景
實驗目的
實驗原理
實驗設備及材料
實驗方法
實驗結果
問題與討論
2
蘇力菌是一種昆蟲病原細菌，屬革蘭氏陽性桿菌，在營
養缺乏或環境不良的時候，蘇力菌會進入不分裂的半靜
止期，或分化形成孢子和殺蟲晶體蛋白質 。
孢子
3
• 質體是一種環狀的 DNA 分子，通常只有數千個鹼基
配對 (kilo-base, kb) ，期生理特性與染色體相同，同樣
具有自我複製的能力。
• 表現蘇力菌殺蟲晶體蛋白質的基因，稱為cry 基因，
大多位在大小約60-300 kb的 質體 上 (plasmid) 。
• 在同一個質體 上，時常具有一種以上cry 基因同時存
在。
4
Cry是殺蟲基因名稱 ，其中包含以下幾種：
• Cry1 對鱗翅目 有毒殺蟲效果。
• Cry2 對鱗翅目 及雙翅目或單獨 對雙翅目 有
效。
• Cry3只對鞘翅目 有效 。
• Cry4只對雙翅目 有效。
5
體 (plasmid) ，以作為後續蘇力菌殺蟲基因檢測(PCR)
之模板 DNA或限制酶切割及電泳分析等分生實驗。
6
•鹼裂解法 (Modified Alkaline lysis method)
體分解或破碎，以釋出質體 DNA
(column chromatography) 方法，將質體DNA
取完成。
7
• 材料
1. LB(Luria-Bertani )培養液 • 設備
2.微量離心管、微量吸管 (Pipette) 1. 滅菌釜
3.見達利蘇力菌生物性農藥 2. 無菌操作台
4.質體 DNA 抽取套組 3.迴轉式培養器
5. 洋菜膠 (agrose) 4. -20℃冰箱
6. TAE Buffer 5. 震盪器
7. 6X DNA loading dye 6.桌上 型離心機、高速離心機
8. HealthView Nucleic Acid Stain 7. DNA水平電泳槽 (Major Science)
8. 鑄膠器套組
8
一、蘇力菌隔夜培養
1 、先配 置 LB培養液
文档评论（0）