原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
l．caseizhang对小鼠t淋巴细胞亚群及血清igg和肠黏膜sia的影响
L．casei Zhang对小鼠T淋巴细胞亚群及血清IgG和肠黏膜sIA 的影响
张和平，张七斤，孟和毕力格，任贵强，阿木尔吉日嘎拉
(内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室，内蒙古呼和浩特010018)
摘 要：对从内蒙古传统发酵酸马奶中分离筛选的L．casei Zhang~ 小鼠T淋巴细胞亚群、血清IgG和肠黏膜sIgA的影响进行了研究。结果
表明，L．casei Zhang~以显著提高小鼠外周血中CD3 、CD4 、CD8 的比例，优化了CD4 ／CD8 比值．同时L．casei ZhangK以显著增加小鼠
血清IgG质量浓度和小鼠肠~~~iSlga质量浓度。这些结果说明了L．caseiZhang对小鼠的细胞免疫、体液免疫及肠黏膜局部免疫具有调节
功能
关键词：L．casei Zhang；T淋巴细胞亚群；免疫调节
中图分类号：TS252．1 文献标识码：A 文章编号：1001—2230(2006)10—0004—05
内蒙古农业大学“乳品生物技术与工程”教育部重点实验室从1994年开始到现在已从内蒙古、新疆、青海及蒙古国自然发酵的乳制品(包括酸牛乳、酸马乳、酸山羊乳、酸牦牛乳、酸驼乳)中分离鉴定出1 858株乳酸菌，初步建立了我国第一个原创性的、具有自主知识产权的乳酸菌菌种资源库。本研究选取的L．casei Zhang为实验室分离于内蒙古传统发酵酸马乳中的一株乳杆菌[61，其种属归类已经通过16S rDNA 同源性分析。与标准菌株GeneBank Lb．casei ATcc 334的同源性为100％171。该菌株具有良好的耐酸性、人工胃肠消化液耐受性及胆盐耐受性181。本研究就L．casei Zhang的部分免疫4维普资讯 Research Papers研究报告功能进行了研究， 以期为进一步开发利用奠定理论基础。
1 材料与方法
1．1 L．casei Zhang的来源及培养
L．casei Zhang为分离于内蒙古传统发酵酸马乳中的一株乳杆菌，由内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室分离保存。将casei Zhang接种于M RS培养液，37 ℃ 培养
18 h，3 000 g离心10 min收集菌体，用灭菌生理盐水离心洗涤后分散于10％灭菌脱脂乳中并调整其菌数为2．Ox10mmL (BCP琼脂培养基培养计活菌数确认)后，- 80℃ 保存备用。
1．2 试验动物及饲喂方式
昆明系小白鼠购自内蒙古大学实验动物研究中心，体重为18-22 g，每组10只，雌雄各半。实验动物分组、L．casei Zhang灌服剂量如表1所示。
1．3 L．casei Zhang对小鼠外周T淋巴细胞及其亚群影响的分析m E．casei Zhang按表1设计方案灌服给各实验组小鼠，灌服剂量随体重增加而增量，每日1次，分别在第10 d和20 d灌服1 h后摘眼球采血1．0-1．5 mL，每毫升血液中加一个单位的肝素钠， 然后采用流式细胞术双抗标记法[91，使用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞CD3+,CD4 和CD8 淋巴细胞质量分数。所用试剂：BD PharmingenTM FITC anti-mouseCD3e (Lot：01 965)，BD PharrningenTM PE anti-mouseCD4 (Lot：0000066972)，BD PharmingenTM PE an—ti-m ouse CD8a (Lot：OOOOO66405)，BD Pharmingen。PE anti-mouse CD19 (Lot：0000080204) 免疫荧光单
克隆抗体及溶血素。
1．4 L．casei Zhang对小鼠血清IgG~la肠黏膜SIgA质量浓度影响分析
将L．casei Zhang按表1设计方案灌服给各实验组小鼠，从第5 d开始每隔5 d进行血清IgG和肠黏膜StgA质量浓度的测定，至f：g30 d。小鼠血清IgG质量浓度的测定： 各实验组小鼠在采血前禁食10 h，摘眼球从眼眶采血，经常规分离血清于Eppendore~d：中，置一20 oc保存待测。测定时采用双抗体夹一L,ABC—ELISA法。用抗小鼠IgG单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的IgG与单抗结合，加入生物素标记的抗小鼠IgG，形成免疫复合物连接在板上，与辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入酶底物OPD显色， 加硫酸终止液在492 nm处测OD值。IgG质量浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中IgG质量浓度。肠黏膜SIgA质量浓度的测定：将小鼠眼眶采血处死后．立即取空肠和回肠刮取肠黏膜黏液层于Eppen—do艚中，加入约等体积胰蛋白酶抑制剂(pH值为7．4)PBS溶液，并轻微搅拌约30 m_in，置4℃ 冰箱保存10 h，
文档评论（0）