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苦豆子渣中总黄酮含量的测定 【摘要】建立苦豆子渣中总黄酮含量的测定方法，苦豆子再利用提供依据，本实验采用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH分光光度法测定苦豆子渣中黄酮的含量。芦丁对照品在浓度，回归方程为Y=11.403X+0.0021R=0.9998，方法回收率98.67%~100.33% ，=1.65%(n=)。建立的方法简便快速、成本低，可用于苦豆子渣中总黄酮含量的测定。 苦豆子渣 总黄酮 分光光度法 苦豆子是豆科槐属的多年生草本植物， 广泛分布于我国西北一带， 我国对其药用记载较多。药用根、茎、全草及种子，味苦性寒，有清热解毒、祛风燥湿、止痛杀虫、抗炎、免疫调节、抗肿瘤、治疗乙型肝炎的药理活性等作用[1] ，其主要活性成分为生物碱。随着现代药理药效学研究的不断深入，近年研究发现，苦豆子的主要化学成分除生物碱外，还有黄酮类、有机酸、氨基酸、蛋白质和多糖类成分[2]。据宁夏调查紫金花集团药业有限公司和相关系列产品的开发，宁夏盐池县金豆植物生化有限公司等多家企业苦豆子生物碱提取苦豆子饲料我们对其苦豆子渣进行了进一步的研究。这不仅对保障人类健康有重要作用， 而且还有着重大的社会、经济和环境效益。仪器与药品 722型可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司），KA-1000台式离心机（上海安亭科学仪器厂），RE-52A旋转蒸发上海亚荣生化仪器厂，SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司），HH-Ⅰ恒温水浴锅（国华电器有限公司），JY3002电子天平（上海精密科学仪器有限公司），TG322A微量分析天平（湘仪天平仪器厂），KQ2200型超声波清洗器（昆山市超生仪器有限公司）。 提取生物碱后的苦豆子种子渣（宁夏紫金花集团药业有限公司），芦丁对照品（中国药品生物制品检定所），无水乙醇氢氧化钠亚硝酸钠硝酸铝。 对照品溶液的制备称取芦丁对照品10.0mg，置100m容量瓶中，加入60%乙醇70m置恒温水浴上微热使之溶解（45），，再加60%乙醇至刻度，摇匀，配成0.100mg/m的对照品溶液[]。标准曲线制备 精确量取对照品溶液0.001.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL分别置10m容量瓶中，各加60%乙醇至5m10%亚硝酸钠溶液0.30m摇匀，放置6min，然后再加入10 %的硝酸铝溶液0.30m摇匀，放置6min，最后加入1mo/L氢氧化钠溶液4.00m加蒸馏水至刻度，摇匀，放置15min，照分光光度法[]，在50nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线其回归方程为 Y=X+0.0021，相关系数为R=0.999， 0.01000.0500 mg/mL范围内呈良好的线性关系样品提取方法的选择1.2.3.1超声提取法 取苦豆子渣粉2.00 g，加入20 mL75 %乙醇，超声提取三次，每次1 h，合并滤液，减压浓缩至浸膏，加入60 %乙醇溶解，定容至10 mL，摇匀，作为供试品溶液。 1.2.3.2 索氏提取法 取粉碎过筛后的苦豆子渣子2.00 g，60 mL 75 %乙醇，85℃下回流至流液几乎无色为止，将提取液减压浓缩至浸膏，加入60 %乙醇溶解，定容至10 mL，摇匀，作为供试品溶液。 1.2.3.3热回流提取法 取粉碎过筛后的苦豆子渣子2.00 g，20 mL75 %乙醇，85℃下热回流提取3次，每次回流2 h，合并滤液，减压浓缩至浸膏，加入60 %乙醇溶解，定容至10 mL，摇匀，作为供试品溶液 [5]。 上述三种方法提取的供试品溶液，同的测定方法进行操作，表：表 三种不同提取方法的比较 超声波提取0.291 索氏提取0.343 热回流提取0.594 1.2.4精密度实验 精确吸取对照品2.00m，同一供试品溶液0.50m，各5份， 同的方法进行操作，测定吸光度。结果表明对照品吸光度的RSD=.27%5%(n=5)，供试品吸光度的RSD=.36%5%(n=5)，说明精密度良好。见表表 精密度实验结果 1 2 3 4 5 RSD(%) 供试品吸光度0.225 0.228 0.228 0.231 0.223 0.227 1.36 对照品吸光度0.235 0.236 0.234 0.230 0.230 0.233 1.27 1.2.5稳定性实验 精确吸取对照品2.00m，供试品溶液0.50m，同的方法进行操作，在1020、30、40、50、60 min内测定其吸光度变化。结果表明对照品RSD=0.%5%，供试品RSD=1.%5%，均在60min内基本稳定。见表。表 稳定性实验结果 时间（min） R