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发酵工程控制 温度变化及其控制 /jpkc/fjgc 可根据实测发酵过程中物质平衡计算生物热。例如某味精厂50M3发酵罐发酵过程测定结果的主要物质变化如表: 发酵时间(h) 0~6 6~12 12~18 18~31 糖 -37 -30.3 -24.0 -41.7 谷氨酸 5.9 15.4 23.9 尿素 -2.9 -6.0 菌体 4.8 6.0 1.2 玉米浆 -2.4 -3.0 -0.6 发酵工程控制 温度变化及其控制 /jpkc/fjgc 发酵12~18小时的生物热为: Q生物=24×159555.9+0.6×12309.2+6×10634.5-1.2×20934-15.4×15449.3=191098.1KJ/M3 191098.1÷6=31849.7 每小时的生物热为31849.7KJ/M3 发酵工程控制 温度变化及其控制 /jpkc/fjgc 四、利用温度控制提高产量 例1 利用热冲击处理技术提高发酵甘油的产量 背景: (1)酵母在比常规发酵温度髙10~200C的温度下经受一段时间刺激后,胞内海藻糖的含量显著增加。 (2)Lewis发现热冲击能提高细胞对盐渗透压的耐受力 (3)Toshiro发现热冲击可使胞内3-磷酸甘油脱氢酶的活力提高15~25%,并导致甘油产量提高 发酵工程控制 温度变化及其控制 /jpkc/fjgc 实验:甘油发酵是在髙渗透压环境中进行的,因此可望通过热冲击来提高发酵甘油的产量 正交条件A 冲击温度(0C) 40,45,50 B 开始时机(h) 8,16,30 C 冲击时间(分) 15,30,60 结果发酵16小时,450C冲击30分钟最佳,发酵96小时后甘油浓度提高32.6%,发酵罐实验见图 (A)16h,450C,30min (B)12h,450C,30min 发酵工程控制 温度变化及其控制 /jpkc/fjgc A 温度;B 开始时机;C 冲击时间 发酵工程控制 温度变化及其控制 /jpkc/fjgc 发酵工程控制 温度变化及其控制 /jpkc/fjgc A比B好 发酵工程控制 温度变化及其控制 /jpkc/fjgc 例2 重组大肠杆菌人Cu/Zn-SOD的高表达 Lac启动子,用乳糖作诱导剂 270C 300C 340C 370C SOD 4966 14270 6590 4638 比活 810 1471 679 526 蛋白 6.129 9.70 9.79 11.88 OD600 7.41 10.72 11.78 24.77 发酵工程控制 温度变化及其控制 /jpkc/fjgc 原因: 1、乳糖被用于合成菌体和其它蛋白,减少了合成SOD的原料,随着温度升高,蛋白和菌浓都增加。 2、高温下可能SOD降解速率增加,杂蛋白增加 3、低温下由于比生长速率低,质粒脱落减少 4、低温下菌的衰老减缓,死亡率低 发酵工程控制 温度变化及其控制 /jpkc/fjgc 小 结 微生物最适生长温度 微生物对温度的要求不同与它们的膜结构有关 微生物的生长温度与细胞膜的液晶温度范围相一致 微生物对温度的要求与酶分子结构的区别有关,如蛋白构象稳定性因素改变,活性位点关键区域氨基酸的取代,离子束缚作用(ion binding)减弱,蛋白核心区域疏水作用下降等 发酵工程控制 温度变化及其控制 /jpkc/fjgc 温度对发酵的影响: 温度影响反应速率 温度影响发酵方向 最适温度的选择 根据菌种 生长阶段选择 根据培养条件选择 菌种的生长情况 发酵工程控制 温度变化及其控制 /jpkc/fjgc 发酵过程引起温度变化的因素 发酵热是引起发酵过程温度变化的原因 Q发酵=Q生物+Q搅拌-Q蒸发-Q辐射 生物热的定义,产生的原因:基质代谢。它与菌种、发酵类型、生长阶段、营养条件有关 搅拌热与搅拌功率有关 发酵热测定: 冷却容量 燃烧热 发酵工程控制 温度变化及其控制 /jpkc/fjgc 思考题 7.16 根据微生物对温度的依赖可分类成哪几类微生物? 7.17 微生物对温度要求不同的原理是什么? 7.18 发酵过程的温度会不会变化?为什么 7.19 发酵热的定义 7.20 生物热的大小与哪些因素有关? 7.21 温度对发酵有哪
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