水稻低cd累积相关基因rna干扰载体及根特异性表达载体的构建.pdfVIP

第３２卷第２期 中国科学院大学学报 Ｖｏｌ. ３２ Ｎｏ. ２ ２０１５年３月 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｍａｒｃｈ ２０１５　 文章编号:２０９５￣６１３４(２０１５)０２￣０１８５￣０７ 水稻低 Ｃｄ累积相关基因ＲＮＡ 干扰载体 及根特异性表达载体的构建∗ 陈煜娴ꎬ冯珊珊ꎬ柴兴苹ꎬ柴团耀† (中国科学院大学生命科学学院ꎬ北京 １０００４９) (２０１４年４ 月２２ 日收稿ꎻ２０１４年５月７ 日收修改稿) Ｃｈｅｎ Ｙ ＸꎬＦｅｎｇ Ｓ ＳꎬＣｈａｉ Ｘ Ｐꎬｅｔ ａｌ. Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ＲＮＡｉ ａｎｄ ｒｏｏｔ￣ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｖｅｃｔｏｒｓ ｏｆ ｇｅｎｅｓ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｌｏｗ Ｃｄ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ｉｎ ｒｉｃｅ[Ｊ]. Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓꎬ２０１５ꎬ３２(２):１８５￣１９１. 摘　 要　 Ｃｄ极易被水稻等作物吸收并伴随食物链在人体内累积ꎬ严重威胁人类健康.基于水 稻Ｃｄ 累积机制的现有研究ꎬ克隆与水稻Ｃｄ 累积相关的基因ＯｓＬＣＤ 和ＯｓＨＭＡ３ꎬ并克隆一个维 管组织特异性表达的启动子ＯｓＭＴＰ１１Ｐꎬ利用Ｇａｔｅｗａｙ 技术及传统酶切、连接方法ꎬ成功构建适 用于水稻等单子叶植物农杆菌转化的ＲＮＡ 干扰载体 ｐＲＩ￣Ｍ￣ＬＣＤ 和根特异性表达载体 ｐＣＢ２０２２￣Ｈ.期望通过这２ 个载体共转化水稻ꎬ使大量的Ｃｄ 扣留在根细胞的液泡中ꎬ限制Ｃｄ 向地上部分及籽粒中的转运ꎬ从而实现Ｃｄ在水稻籽粒中的低累积. 关键词　 水稻ꎻＲＮＡ 干扰ꎻ组织特异性表达ꎻ低镉累积ꎻ多基因转化ꎻ载体构建 中图分类号:Ｓ５１１　 　 文献标志码:Ａ　 　 ｄｏｉ:１０７５２３/ ｊ.ｉｓｓｎ.２０９５￣６１３４２０１５０２００６ Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ＲＮＡｉ ａｎｄ ｒｏｏｔ￣ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｖｅｃｔｏｒｓ ｏｆ ｇｅｎｅｓ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｌｏｗ Ｃｄ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ｉｎ ｒｉｃｅ ＣＨＥＮ ＹｕｘｉａｎꎬＦＥＮＧ ＳｈａｎｓｈａｎꎬＣＨＡＩ ＸｉｎｇｐｉｎｇꎬＣＨＡＩ Ｔｕａｎｙａｏ (Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ ＳｃｉｅｎｃｅꎬＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙ ｏｆ ＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＢｅｉｊｉｎｇ １０００４９ꎬＣｈｉｎａ) Ａｂｓｔｒａｃｔ　 Ｃｄ ａｃｃｕｍｕｌａｔｅｄ ｉｎ ｓｏｉｌ ｃａｎ ｂｅ ｅａｓｉｌｙ ａｂｓｏｒｂｅｄ ｂｙ ｒｉｃｅ ａｎｄ ｅｎｒｉｃｈｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｂｏｄｙ ｔｈｒｏｕｇｈ ｆｏｏｄ ｃｈａｉｎ. Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｆｏｒ ｔｈｅ ｌｏｗ Ｃｄ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ｉｎ ｒｉｃｅ ｈａｓ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｐｒａｃｔｉｃａｌ ｖａｌｕｅ ｆｏｒ ｓｔａｎｄａｒｄ ｒｉｃｅ ｂｒｅｅｄｉｎｇ ａｎｄ ｓａｆｅｔｙ ｏｆ ｆｏｏｄ ｃｒｏｐｓ. Ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｇｅｎｅｓ ａｒｅ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｔｈｅ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎꎬｔｒａｎｓｐｏｒｔꎬａｎｄ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｄ ｉｎ ｒｉｃｅ. Ｔｈｅ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ ｏｆ ｍｕｌｔｉ￣ｇｅｎｅ ｃｏ￣ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｆａｃｉｌｉｔａｔｅｓ ｔｈｅ ｇｅｎｅｔｉｃ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｌｏｗ Ｃｄ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ｉｎ ｒｉｃｅ ｇｒａｉｎ. Ｗｅ ｃｌｏｎｅｄ ｔｗｏ ｇ