真核基因表达调控教学教材.pptVIP

转录活跃区域对核酸酶的敏感度增加 ： DNaseⅠ超敏感位点特点： （1） 一般在转录起始点附近，即5’启动子区域 （2） 低甲基化区 （3） 不存在核小体结构 （4） 裸露易与反式作用因子结合 第三节 真核生物转录水平上的基因表达调控 尽管真核生物基因表达的调控可以在多个层次上进行，但是最主要、最经济的调控仍然是转录水平的调控。 一、真核基因调控的顺式作用元件 影响自身基因表达活性的非编码DNA序列。如启动子、增强子、沉默子等 1. 启动子 2.增强子enhancer   是一种远端调控元件，能使与它连锁的基因转录频率明显增加的DNA序列。 增强子区的跨度一般有100－200bp，和启动子一样，由一个或多个各具特征的DNA序列组成，常由8－12bp的核心序列：（G）TGGA/TA/TA/T（G），和其他序列相间排列。 增强子也要通过与特定的蛋白质因子(转录因子)结合而实现其对转录的增强作用。 增强子的作用机理（成环模型）： 与转录激活子（ activator，增强子结合蛋白）结合，改变DNA分子的构型；使DNA弯曲形成环状结构，便于转录复合体的形成，从而促使远距离的启动子的转录。 增强子竞争控制基因表达 增强子特点： ① 增强效应十分明显，一般能使基因转录频率增加10-200倍 ② 增强效应与其位置和取向无关，不论增强子以什么方向排列（5‘→3’或3‘→5’），甚至和靶基因相距3 kb，或在靶基因下游，均表现出增强效应； ③ 增强效应有严密的组织和细胞特异性，说明增强子只有与特定的蛋白质（转录因子）相互作用才能发挥其功能； ④ 没有基因专一性，可以在不同的基因组合上表现增强效应； ⑤ 许多增强子还受外部信号的调控，如金属硫蛋白的基因启动区上游所带的增强子，就可以对环境中的锌、镉浓度做出反应。 3.沉默子silencer： 类似增强子但起负调控作用的顺式作用元件。有人称为沉默基因。 沉默子与相应的反式作用因子结合后，可以使正调控系统失去作用。 二、真核基因调控的反式作用因子 1.定义：不论是启动子还是增强子都必须与特定的蛋白质的相互作用才能调控基因的表达。能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上，参与调控靶基因转录效率的蛋白质称反式作用因子。如TFⅡD（TATA）、CTF（CAAT）、SP1（GGGCGG）、HSF。 2.反式作用因子通过不同的途径发挥调控作用： 与顺式调控元件相互作用； 与配基结合； 与其它蛋白质相互作用。 3.DNA结合结构域的结构特征 DNA结合结构域大体上有3种主要结构特征： α螺旋－转角－α螺旋(helix-turn-helix, HTH)结构 锌指(zinc finger)结构 碱性亮氨酸拉链(leucine zipper)结构 * * 基因的表达与调控(下) —真核基因表达调控 主要内容 真核生物基因表达调控的特点 真核生物DNA水平上的基因表达调控 真核生物转录水平上的基因表达调控 真核基因转录后水平上的调控 一、真核基因组结构特点 真核基因组结构庞大 3×109bp DNA与蛋白质结合，形成染色质结构 基因不连续性 断裂基因（interrupted gene）：内含子(intron)、 外显子(exon) 非编码区较多 多于编码序列(9:1) 含有大量重复序列 第一节 真核生物基因表达调控特点 The eukaryotic ribosomal DNA repeating unit P S 外显子 S P L 外显子 L 外显子 2 外显子 3 DNA 50b 2800bp 161bp 4500bp 205bp 327bp 初始转录本： 在唾腺中转录 成熟 mRNA ： 1663nt 初始转录本： 在肝中转录 成熟 mRNA ： 1773nt 小鼠淀粉酶 ( amy ) 基因利用不同