HLA多态性的遗传基础技术 培训.pptVIP

HLA多态性的遗传基础 多态性：指随机婚配的群体中存在 两种以上的等位编码基 因，在群体中可以编码多 种抗原分子。; 一、复等位基因(multiple alleles) 等位基因(alleles)：位于同源染色体对 应位置的一对基因。 复等位基因：在群体中位于同一基因位点而具有不同编码特性的基因系列。是群体的基因概念。; 二、共显性表达(co-dominant) 每一对等位基因位点的两个基因均为 显性基因，其编码分子可同时表达于细胞 膜表面。 可检出(群体)：A基因 --- 约27种； B基因 --- 约50种； C基因 --- 约10种； DR基因 --- 约23种； DQ基因 --- 约9种； DP基因 --- 约6种。;; 1. 血清学分型法 --- 补体介导的微量细胞毒试验 原理： 抗体(HLA分型) + 淋巴细胞(受者) + 补体 ?淋巴细胞受损 ? 判定结果 （细胞死亡百分率） 主要应用：检测HLA-A、B、C抗原。; 2. 细胞学分型法 --- 混合淋巴细胞培养法（MLC) 分为：单向法和双向法 原理： 单向法：淋巴细胞(供者，X 线或丝裂霉素 处理) + 淋巴细胞(受者) ? 培养 ? 淋巴母细胞(判定结果)； 双向法：淋巴细胞(供者) + 淋巴细胞(受者) ? 培养 ?淋巴母细胞(判定结果)。 主要应用：检测DR抗原 ; 3. 基因分型法 --- 分子生物学技术 原理：比较供、受者编码HLA抗原基因 的DNA序列，判定供、受者间的 相似程度。 主要方法： (1) RFLP (限制性片段长度多态性)法 (2) PCR- RFLP法 (3) PCR-SSO(顺序特异性寡核苷酸)法 (4) PCR-SSCP(单链构象多态性）法; 第六节 HLA在医学上的意义 一、器官移植 移植成败的关键是供受者间主 要组织相容性抗原的相容程度。 HLA配型：--- 组织相容性试验对供、受者HLA进行鉴定。 ; 二、免疫应答 1. 抗原提呈与MHC的限制性 抗原递呈： 抗原 ? APC ? HLA-Ⅰ类分子- 抗原肽复合物 ? 表达于细胞膜表面 ? CD8+T细胞识别； 抗原 ? APC ? HLA-Ⅱ类分子- 抗原肽复合物 ? 表达于细胞膜表面 ? CD4+T细胞识别。 ; MHC限制性（或称限制性识别）： 特定T细胞识别特定类别的自身 MHC分子而发挥免疫学效应的 现象。; 三、HLA与疾病的关系 R.R (relative risk，相对危险率) = R.R值越大相关性越强。 举例：（1）强直性脊柱炎与B27 （2）胰岛素依赖性糖尿病 （IDDM）与DR3、DR4; 四、HLA与肿瘤的关系