细胞生物学研究技巧方法专题讲座.ppt

扫描隧道显微镜成像 STM image, Benzene molecules accumulate at step edges on Cu 三、显微操作技术micromanipulation technique 在倒置显微镜下利用显微操作器进行细胞或早期胚胎操作的一种方法。显微操作器是用以控制显微注射针在显微镜视野内移动的机械装置。 显微操作技术包括细胞核移植、显微注射、嵌合体技术、胚胎移植以及显微切割等。 细胞核移植技术已有几十年的历史，Gordon等人（1962）对非洲爪蟾进行核移植获得成功。我国著名学者童第周等上个世纪70年代在鱼类细胞核移植方面进行了许多工作，并取得了丰硕成果。 显微操作仪 第二节 细胞分离技术 一、离心技术 是分离细胞器（如细胞核、线粒体、高尔基体）及各种大分子基本手段。 转速为10~25kr/min的离心机称为高速离心机。 转速25kr/min，离心力89Kｇ者称为超速离心机。 目前超速离心机的最高转速可达100000r/min，离心力超过500Kg。 （一）差速离心 Differential centrifugation 特点： 介质密度均一； 速度由低向高，逐级离心。 用途：分离大小相差悬殊的细胞和细胞器。 沉降顺序：核——线粒体——溶酶体与过氧化物酶体——内质网与高基体——核蛋白体。 可